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目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）瘤组织表皮生长因子受体（EGFR）基因突变及TaqMan MGB探针实时荧光PCR快速检测EGFR突变的诊断价值。方法应用聚合酶链（PCR）反应，对80例手术切除NSCLC瘤组织EGFR基因的第18、19和21外显子片段进行扩增和测序，Chromas软件分析基因突变。设计EGFR突变位点的TaqMan MGB探针，采用实时PCR检测瘤组织EGFR突变，并与测序结果比较。实时PCR的敏感性与特异性评价，用不同混合数量的PC-9细胞（19外显子缺失）为阳性参照。结果21例NSCLC瘤组织存在EGFR基因突变，总体突变率为26.3%。其中13例为EGFR第19外显子阅读框内多核苷酸的缺失，8例为第21外显子2573位核苷酸点突变。诊断的特异性与敏感性均为100%。当PC-9突变型细胞仅占10%时或PC-9细胞数低达50只时，PCR仍然检测到EGFR基因突变的存在。女性、不吸烟和肺腺癌患者EGFR基因突变率显著高于男性、吸烟和非腺癌患者（P＜0.05）。EGFR基因突变与患者年龄、TNM分期等因素无关。结论NSCLC存在EGFR基因的突变或缺失，其中以女性、腺癌和不吸烟患者突变率较高。TaqMan MGB探针联合实时PCR可有效地检测出EGFR基因突变，操作简便，易于临床推广。