【摘 要】
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为了研究绵羊Zfy基因干扰载体对性控效果的影响,本试验利用RNA干扰技术针对绵羊Zfy基因mRNA序列设计、构建3个shRNA干扰载体(pLL3.7-A、pLL3.7-B和pLL3.7-C),并对体外培养的
【机 构】
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石河子大学动物科技学院,内蒙古通辽市农畜产品质量安全中心
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为了研究绵羊Zfy基因干扰载体对性控效果的影响,本试验利用RNA干扰技术针对绵羊Zfy基因mRNA序列设计、构建3个shRNA干扰载体(pLL3.7-A、pLL3.7-B和pLL3.7-C),并对体外培养的生精细胞进行转染,利用qRT-PCR测定Zfy基因mRNA表达丰度,从而筛选出有效的干扰载体.然后将效果较好的干扰载体通过绵羊睾丸注射,进行体内干扰试验.qRT-PCR检测结果显示:成功构建了3个干扰载体,其中pLL3.7-A、pLL3.7-B对生精细胞Zfy基因的表达水平分别下降了54％(P＜ 0.05)、26％(P＜ 0.05),而pLL3.7-C对其干扰效果不明显(P＞0.05);pLL3.7-A、pLL3.7-B干扰载体的体内干扰试验结果显示,后代雌羔率分别为64.7％(P＜0.01)、44.4％(P＞ 0.05).本研究结果表明,本实验构建的干扰载体对绵羊Zfy基因产生干扰作用,且使后代性别比例发生一定程度的偏移,为进一步研究绵羊性别控制提供了理论依据.
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