利用同步荧光光谱建立了一种新的荧光比率法检测过氧亚硝酸根(ONOO-)及评价其清除剂的方法。酪氨酸自身有荧光,在pH 8.5的磷酸缓冲溶液中,酪氨酸与CO2和ONOO-反应生成强荧光的酪氨酸二聚体,利用同步荧光光谱技术,在荧光发射光谱中能同时获得酪氨酸单体(λem=364nm)与二聚体的荧光峰(λem=406nm),且两峰的荧光强度的比值与ONOO-的浓度呈计量相关。结果表明荧光强度的比值不受实验参数改变的影响,与传统的荧光法相比,有利于扩大检测的线性范围,提高灵敏度。荧光强度的比值与ONOO-的浓度在1.60×10-7mol·L-1~6.00×10-6mol·L-1范围内呈线性关系,线性相关系数为0.999,检测限为1.84×10-8mol·L-1。对浓度为1.00×10-6mol·L-1ONOO-平行测定8次,其相对标准偏差为2.4%。利用该法测得抗癌药米托蒽醌的IC50为0.065μg·mL-1。方法简便易行,试剂廉价易得,体系稳定,可作为一种检测ONOO-及筛选其清除剂的方法。