【摘 要】
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犬细小病毒(CPV)编码的VP2基因容易发生变异,导致病毒嗜性和致病性的改变。为制备一株高致病性的CPV毒株(NY株,基因型为2a型)重组VP2蛋白,构建重组原核表达载体pET28a-CPVVP2,转
【机 构】
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南阳师范学院南阳市兽医生物工程技术研究中心河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室/昆虫生物反应器河南省工程实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金青年基金项目(31101837), 河南省重点科技攻关项目(142102110101), 南阳师范学院引进人才专项项目(70640), 2015年度研究生创新项目(2015CX003)
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犬细小病毒(CPV)编码的VP2基因容易发生变异,导致病毒嗜性和致病性的改变。为制备一株高致病性的CPV毒株(NY株,基因型为2a型)重组VP2蛋白,构建重组原核表达载体pET28a-CPVVP2,转化E.coli BL21(DE3)表达菌株,通过不同温度、不同IPTG浓度和不同诱导时间等条件的优化进行表达蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果表明,重组CPV-NY毒株VP2蛋白(rVP2)的分子质量约为72ku,在不同温度条件下均以包涵体形式存在,在37℃条件下以终浓度为
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