腰带长体茧蜂cDNA文库的构建

来源 :南京农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxw1314159
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从寄生在亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)幼虫体内6 d的腰带长体茧蜂(Macrocentrus cingulum)胚胎中提取总RNA和mRNA,用分离到的微量mRNA合成cDNA第1链.通过长距离PCR扩增得到足够量的双链cDNA.将sfiⅠ酶切后并纯化的cDNA片段连接到经sfiⅠ酶切的噬菌体λTripIEx2上,并对噬菌体进行包装,建成cDNA的全长库.经大肠杆菌XL1-Blue平板检测,未扩增文库的滴度为0.75×106pfu@mL-1,克隆重组百分率为96.77%,扩
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