【摘 要】
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目的 检测microRNA-10b(miR-10b)在大肠癌患者中的表达情况,并探讨miR-10b对大肠癌SW480细胞侵袭和转移的影响.方法 收集大肠癌患者标本32例,同时收取癌组织及相应的癌旁组织.通过荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测各组织中miR-10b的表达水平.以脂质体为载体将miR-10b抑制剂转染至SW480细胞,Transwell实验检测转染后SW480细胞的侵袭和迁移能力变化,利用qRT-PCR和免疫印迹实验检测Kriippel样因子4(KLF4) mRNA和蛋白水平的改变.结果
【机 构】
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盘锦市中心医院介入血管外科,辽宁盘锦,112400;盘锦市中心医院普外科,辽宁盘锦,112400;中国医科大学神经生物学教研室,辽宁沈阳,110122
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目的 检测microRNA-10b(miR-10b)在大肠癌患者中的表达情况,并探讨miR-10b对大肠癌SW480细胞侵袭和转移的影响.方法 收集大肠癌患者标本32例,同时收取癌组织及相应的癌旁组织.通过荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测各组织中miR-10b的表达水平.以脂质体为载体将miR-10b抑制剂转染至SW480细胞,Transwell实验检测转染后SW480细胞的侵袭和迁移能力变化,利用qRT-PCR和免疫印迹实验检测Kriippel样因子4(KLF4) mRNA和蛋白水平的改变.结果 miR-10b在32例患者癌组织及正常黏膜组织中的表达量分别为(0.24±0.09)与(0.67±0.28),差异有统计学意义(P＜0.01).下调miR-10b的表达能够显著抑制SW480细胞的侵袭和迁移能力,KLF4 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高,P＜0.01.结论 MicroRNA-10b在大肠癌中低表达,并可能通过上调KLF4的表达抑制大肠癌SW480细胞侵袭和转移.“,”Objective To examine the expression of microRNA-10b(miR-10b) in colorectal cancer,and to investigate the effects of miR-10b on invasion and migration of SW480 cell line.Methods We detected miR-10b expressions by quantitative real-time PCR(qRT-PCR) in 32 colorectal cancer tissues and their corresponding adjacent tissues.The miR-10b inhibitor was transfected into SW480 cells with Lipofectamine,and invasion and migration ability of SW480 cells were detected by transwell cell assay,qRT-PCR and Western blot were used to examine the mRNA and protein expression of Kriippel like factor 4 (KLF4)respectively.Results The expression level of miR-10b in the carcinoma tissues and normal tissues of 32 patients were (0.24 ± 0.09) and (0.67 ± 0.28) respectively,and there was significant difference statistically(P＜0.01).The invasion and migration ability of SW480 cells were markedly inhibited by the inhibition of miR-10b,and the expression of KLF4 mRNA and protein was upregulated significantly too(P＜0.01).Conclusion The expression of miR-10b in colorectal cancer tissues was down-regulated,and the inhibition effect of miR-10b inhibitor on the invasion and migration ability of SW480 cells might be related to the upregulation of KLF4 expression.
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