甘薯薯瘟病菌特异性PCR快速检测方法

来源 :江苏师范大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:sailala77882001
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针对目前甘薯薯瘟病鉴定耗时长,且缺乏特异性标记的问题,首先根据薯瘟病菌Ralstonia solanacearum特异性基因orf428设计了一对特异性分子检测引物,对13株薯瘟病菌、3株甘薯其他病原细菌和12株其他7种寄主青枯菌进行PCR检测,结果显示,只有薯瘟病菌能特异扩增1 641 bp的目标序列,且对菌体DNA最低检出率达到1 pg/μL.其次,通过水煮法快速提取DNA,简化了DNA提取方法;在PCR体系中加入体积分数为1%的二甲基亚砜(DMSO)后,扩增条带更为明亮,优化了PCR检测体系.此技术易于操作、灵敏度高、特异性强,可用于对病残体、发病植株和种苗中的薯瘟病菌检测,以对甘薯薯瘟病进行预测、监测及防治具有重要意义.
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