【摘 要】
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目的:研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)肥大的信号转导途径中PKCζ与Raf的作用关系.方法:[3H]-亮氨酸掺入反映VSMC蛋白质合成;Western blotting检测ERK1
【机 构】
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北京大学医学部生理学与病理生理学系,北京,100083
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目的:研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)肥大的信号转导途径中PKCζ与Raf的作用关系.方法:[3H]-亮氨酸掺入反映VSMC蛋白质合成;Western blotting检测ERK1/2和PKCζ表达;免疫共沉淀实验检测信号分子间的相互作用.结果:AngⅡ刺激可引起VSMC[3H]-亮氨酸掺入显著增加,PKC非特异性抑制剂和PKCζ假底物抑制剂(PS-PKCζ)均明显抑制AngⅡ引起的作用.PS-PKCζ预处理使Ang Ⅱ刺激VSMC的ERK1/2磷酸化水平明显降低.转染dominant negative Raf(Raf S621A)质粒的VSMC中的PKCζ磷酸化水平与转染野生型Raf质粒无明显差异.Ang Ⅱ刺激使Ras与Raf结合增加,但PKCζ抑制剂不影响Ang Ⅱ引起的Raf与Ras的结合.转染Raf S621A抑制Raf活化后,Ang Ⅱ引起的ERK1/2磷酸化水平降低.结论:在VSMC中,PKCζ亚型参与Ang Ⅱ诱导的VSMC蛋白合成,但PKCζ可能通过非依赖Raf的途径激活ERK1/2.
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