基因扩增产物微孔杂交法检测新城疫病毒致病毒株

来源 :城市道桥与防洪 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fang0998_cn

【摘要】

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目的建立一种快速、简便、敏感、实用的方法以检测新城疫病毒致病性毒株.方法在F蛋白裂解位点的两侧设计引物,引物1的5端用生物素标记;按Aus/32强毒株F基因裂解区域设计24个

【作者】

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夏梦岩张卓然秦成赵静

【机构】

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解放军263医院,北京,101149;大连医科大学,大连,116027;辽宁省商检局,大连,116020;

【出处】

：

城市道桥与防洪

【发表日期】

：

2004年期

【关键词】

：

鸡新城疫病毒免疫酶技术聚合酶链反应固相杂交

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目的建立一种快速、简便、敏感、实用的方法以检测新城疫病毒致病性毒株.方法在F蛋白裂解位点的两侧设计引物,引物1的5端用生物素标记;按Aus/32强毒株F基因裂解区域设计24个碱基的寡核苷酸探针,并对之进行5端地高辛标记.生物素化的双链扩增产物被固相的链霉亲和素捕获后经变性成为生物素化单链.然后微孔中加入地高辛标记的探针进行杂交,并用抗-地高辛-碱性磷酸酶显色.结果所建立的方法快速、简便、特异,敏感性比琼脂糖电泳法高约3～4倍,批内CV为9.88%,批间CV为18.31%.结论所建立的方法优化PCR条件后可作为新城疫病毒感染诊断、检疫的常规方法.

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