目的 采用RNA干扰技术（RNAi）技术观察低氧诱导因子-1a（HIF-1a）对人膀胱癌细胞株BIU一87增殖、侵袭及转移的影响。方法体外培养BIU-87细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCIt）和Westernblot检测低氧（90％氮气＋5％氢气＋5％二氧化碳）和常氧下及HIF—lcx—siRNA转染前后BIU-87中HIF-1a、增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的表达；采用磺酰罗丹明B（SRB）法检测HIF-a-siRNA转染后的细胞增殖水平，细胞划痕和Transwell试验检测迁移和侵袭能力。结果低氧8、24h条件下，HIF—ln蛋白（0．56±0．08、1．33±0．21）、MMP-2mRNA（1．85±0．21、2．94±0．29）、MMP-2蛋白（0．68±0．11、1．37±0．22）、MMP一9mRNA（2．08±0．32、3．49±0．44）、MMP一9蛋白（0．89±0．12、1．40±0．23）表达与正常氧条件比较HIF一1d蛋白（0．33±0．05）、MMP一2mRNA（O．95±0．13）、MMP-2蛋白（0．47±0．07）、MMP-9mRNA（1．21±0．17）、MMP一9蛋白（0．58±0．14）表达均显著升高（均P〈0．05），HIF-1a mRNA（1．05±0．09、0．96±0．11）与正常氧条件（1．16±0．13）比较无明显变化；HIF-1a-siRNA转染后与转染前比较能有效沉默HIF—1a与转染前（1．12±0．17、315．25±40．94、96．86±9．85）比较，HIF。1饯．siRNA能降低增殖、侵袭及迁移细胞数（0．63±0．08、139．62±19．67、69．17±7．39）（均P〈0．05）；BIU一87中PCNAmRNA（0．57±0．07）、PCNA蛋白（0．52±0．09）、MMP-2mRNA（0．64±0．08）、MMP-2蛋白（0．53±0．07）、MMP-9mRNA（0．49±0．06）、MMP-9蛋白（0．69±0．07）表达与转染前比较显著降低（0．99±0．14、0．80±0．13、1．06±0．13、0．87±0．12、0．99±0．12、1．12±0．14）（P〈0．05）。结论低氧下，HIF一10l—siRNA通过沉默HIF-1a，降低PCNA、MMP-2、MMP-9表达而抑制膀胱癌细胞增殖、侵袭及转移。
低氧诱导因子-1a沉默对膀胱癌细胞株BIU-87增殖、侵袭及转移的影响
【摘 要】
：
目的 采用RNA干扰技术（RNAi）技术观察低氧诱导因子-1a（HIF-1a）对人膀胱癌细胞株BIU一87增殖、侵袭及转移的影响。方法体外培养BIU-87细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCIt）和Westernblot检测低氧（90％氮气＋5％氢气＋5％二氧化碳）和常氧下及HIF—lcx—siRNA转染前后BIU-87中HIF-1a、增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶（MMP）-2
【机 构】
：
河北省人民医院泌尿外科,石家庄050051,河北省人民医院泌尿外科,石家庄050051,河北省人民医院泌尿外科,石家庄050051,河北省人民医院泌尿外药剂科,石家庄050051
【出 处】
：
中华实验外科杂志
【发表日期】
：
2013年30期
论文部分内容阅读
其他文献
目的 观察大鼠鞘内注射牛磺酸对神经源性疼痛的镇痛作用.方法 脊神经L5/L6结扎复制Wistar大鼠神经痛模型和尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)复制SD大鼠糖尿病神经痛模型.模型成功后鞘内注射不同剂量的牛磺酸(100、200、400μg),检测机械性痛阈值和热痛阈值的变化,以口服加巴喷丁作为阳性对照.之后鞘内注射甘氨酸受体拮抗剂士的宁,检测牛磺酸镇痛作用的变化.结果 牛磺酸200 μg具有明显的镇痛
目的 探讨缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)沉默对胃癌细胞株SGC7901凋亡的影响及其机制.方法 常规培养SGC7901细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot法检测低氧组(90％氮气+5％氢气+5％二氧化碳)和正常氧条件下HIF-2α、B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达；
腔镜甲状腺手术由于其颈部的无瘢痕的美容效果渐成为患者的首选,而喉返神经损伤则是甲状腺手术严重的并发症之一.武汉市第五医院自2011年始实行腔镜喉返神经探查术,对比观察腔镜与开放喉返神经探查术后临床疗效异同,现报道如下。
期刊
目的 建立1种分离人骨肉瘤细株HMG63肿瘤干细胞新模型.方法 采用无血清干细胞培养基对人骨肉瘤HMG63瘤细浮培养形成细胞球,并予阿霉素耐药处理,把耐药细胞株注入裸鼠体内致瘤,致瘤成功后,在瘤体内注射化疗药顺铂,这样使得骨肉瘤肿瘤干细胞在增殖分化的同时反复富集后,提取细胞培养筛选,这样可获得骨肉瘤干细胞和其亚型.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学、流式细胞仪等鉴定.结果 在无
快速康复外科(FTS)是指在围手术期采取一系列优化措施,以减少或减轻手术患者生理及心理创伤应激反应,达到患者快速康复目的的外科处理程序,其核心是减少机体应激反应[1-3].在食管癌治疗中应用FTS来减少患者创伤应激反应,改善患者免疫功能,对促进术后康复有重要意义.本研究旨在探讨FTS在食管癌治疗中的应用及其对患者免疫功能的调节作用。
期刊
目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)条件培养液(CM)对香烟烟雾提取物(CSE)致血管内皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响.方法 体外培养血管内皮细胞和MSCs,并提取MSCs-CM.实验分3组:分别为对照组、CSE组、CM+ CSE组.检测3组内皮细胞凋亡率及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、B淋巴细胞瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白、bcl-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异
目的 探讨诱导人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)分化为成骨细胞过程中表型变化.方法 抽取骨髓分离单个核细胞,用DMEM条件培养基诱导hBMSCs向成骨细胞分化；相差显微镜观察成骨细胞形态,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,分别应用对硝基苯磷酸盐法和BM-Purple法测定成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)分泌量和含量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞ALP mRNA的表达.结果 在诱导第5
目的 观察白细胞介素-17 (IL-17)在糖尿病大鼠肾组织的表达,探讨其参与肾小管-间质病变的机制.方法 55只雄性SD大鼠,随机选择35只以50 mg/kg链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,剩余20只为正常对照组.于2、4周末采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血、尿中IL-17.4周末采用免疫组织化学染色及Western blot检测肾组织中IL-17、α-平滑肌肌动蛋白(α-S
骨髓间充质干细胞(BMSCs)作为一种治疗神经系统损伤的重要干细胞,可通过调节免疫、分泌神经营养因子以及分化成神经元等参与神经系统损伤的修复[1].BMSCs移植治疗神经系统损伤时,比较非损伤区域,会更多的归巢至损伤部位[2],提示可能有趋化因素介导BMSCs向损伤部位迁移,目前机制尚不明确,其中基质细胞衍生因子-1/CXC趋化因子受体-4(SDF-1/CXCR4)生物轴是一个重要的影响因素[3-
期刊
目的 观察大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）和Janus激酶信号转导及转录激活因子（JAK—STAT）信号通路抑制剂AG490联合移植对大鼠局灶性脑缺血／再灌注损伤的神经保护作用。方法制备大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型。按照随机数字表达分为5组，分别设为sham组、1％二甲基亚砜（DMSO）组、AG490组、BMSCs＋1％DMSO移植组、BMSCs＋AG490移植组。移植治疗后24h，Wes
期刊