【摘 要】
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以大豆‘吉育72’为材料，利用PCR克隆技术，克隆大豆蔗糖转运蛋白GmSUT4基因，对其进行生物信息学分析，并利用实时荧光定量PCR方法检测GmSUT4在大豆不同组织及不同胁迫处理下的相对表达量。同时利用酵母系统对GmSUT4基因功能进行初步鉴定。GmSUT4基因全长5 672 bp,CDS区1 518 bp，编码505个氨基酸，具有6个外显子，位于2号染色体Chr.2:40 653 016～40
【机 构】
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吉林农业大学生命科学学院生物反应器与药物开发教育部工程研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（32001464; 321QN182）资助；
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以大豆‘吉育72’为材料，利用PCR克隆技术，克隆大豆蔗糖转运蛋白GmSUT4基因，对其进行生物信息学分析，并利用实时荧光定量PCR方法检测GmSUT4在大豆不同组织及不同胁迫处理下的相对表达量。同时利用酵母系统对GmSUT4基因功能进行初步鉴定。GmSUT4基因全长5 672 bp,CDS区1 518 bp，编码505个氨基酸，具有6个外显子，位于2号染色体Chr.2:40 653 016～40 658 687位置。预测该基因编码的蛋白质分子量大小为54.17kD，等电点为9.04，具有12个跨膜区域。通过序列比对以及进化分析发现，GmSUT4属于SUT4分支，且与其他物种SUT4家族成员高度保守，属于低亲和力蔗糖转运蛋白。另外，组织特异性结果显示，Gm SUT4在大豆的各组织中均有表达，在根中的表达量最高，在叶中表达量最低。通过对水培幼苗进行胁迫处理发现，该基因在干旱、盐和盐碱胁迫下表达量均明显上调。进一步利用酵母突变株SUSY7/ura3对其功能进行验证，同时发现该基因对干旱、盐和盐碱逆境均有响应，且在盐和盐碱胁迫下表型更为明显。GmSUT4基因作为胁迫相关基因可能在大豆逆境中发挥着重要作用。
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