【摘 要】
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目的 观察Pitx2对缺氧诱导的心肌细胞H9c2凋亡的影响.方法 将心肌细胞H9c2分为对照组、模型组(缺氧处理)、Vector组(转染阴性对照载体,缺氧处理)、Pitx2组(转染Pitx2过表达载体,缺氧处理).采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-qPCR)和免疫印迹法分别测定细胞Pitx2 mRNA和蛋白表达变化,四唑盐(MTT)法测定细胞增殖能力,流式细胞术测定细胞凋亡情况,免疫印迹法测定细胞C-Caspase-3、C-Caspase-12和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达变化.将CHO
【机 构】
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南阳医学高等专科学校第一附属医院,河南南阳 473000;南阳医学高等专科学校
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目的 观察Pitx2对缺氧诱导的心肌细胞H9c2凋亡的影响.方法 将心肌细胞H9c2分为对照组、模型组(缺氧处理)、Vector组(转染阴性对照载体,缺氧处理)、Pitx2组(转染Pitx2过表达载体,缺氧处理).采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-qPCR)和免疫印迹法分别测定细胞Pitx2 mRNA和蛋白表达变化,四唑盐(MTT)法测定细胞增殖能力,流式细胞术测定细胞凋亡情况,免疫印迹法测定细胞C-Caspase-3、C-Caspase-12和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达变化.将CHOP和Pitx2过表达载体共转染到心肌细胞H9c2中,测定细胞增殖、凋亡和C-Caspase-3、C-Caspase-12、CHOP表达变化.结果 与对照组比较,模型组心肌细胞Pitx2 mRNA和蛋白表达水平下降,细胞增殖能力降低,细胞凋亡水平增加,细胞C-Caspase-3、C-Caspase-12和CHOP蛋白表达水平增加(P<0.05).与Vector组比较,Pitx2组心肌细胞Pitx2 mRNA和蛋白表达水平均升高,细胞增殖能力升高,细胞凋亡水平降低,细胞C-Caspase-3、C-Caspase-12和CHOP蛋白表达水平降低(P<0.05).CHOP过表达载体可抑制Pitx2缺氧心肌细胞增殖,诱导细胞凋亡.结论 上调Pitx2可抑制缺氧诱导的心肌细胞H9c2凋亡,其作用机制与调控CHOP影响内质网应激有关.
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