【摘 要】
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分离和鉴定产生广谱抗菌活性物质的菌株,并对抗菌物质分离鉴定.通过形态学、生理生化特征和16S rDNA序列分析鉴定菌株.采用紫外线.硫酸二乙酯化学复合诱变的方法,获得抗菌能
【机 构】
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徐州工程学院食品(生物)工程学院,江苏徐州 221018;海滨林场,河北秦皇岛 066100;长江桂柳食品睢宁有限公司,江苏徐州 221000;邳州市金大地肥料有限公司,江苏徐州 221300
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分离和鉴定产生广谱抗菌活性物质的菌株,并对抗菌物质分离鉴定.通过形态学、生理生化特征和16S rDNA序列分析鉴定菌株.采用紫外线.硫酸二乙酯化学复合诱变的方法,获得抗菌能力强、遗传稳定的高产菌株.分别用甲醇提取、凝胶过滤色谱(Sephadex G-10)和半制备高效液相色谱分离纯化抗菌物质,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术对抗菌物质鉴定.本研究从土壤中分离出67 株芽孢杆菌.其中8 株表现出较强的抗菌作用,菌株XF32表现出显著广谱抑制活性,并鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis).菌株XF32对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、铜绿假单胞菌7种病原菌具有抗菌活性,对酿酒酵母、黑曲霉、深绿木霉和尖孢镰刀菌有抗真菌活性.经诱变筛选得到突变菌株XF32-22,对金黄色葡萄球菌的抑菌活性比原始菌株显著提高,分离纯化抗菌物质,得到单一的抗菌成分.MALDI-TOF-MS分析表明抗菌物质为Fengycin系脂肽化合物.采用复合诱变技术,可以有效地提高地衣芽孢杆菌脂肽的产量.成功分离得到对多种病原细菌具有较强抑制作用的Fengycin类脂肽,同时该菌株在拮抗植物病原真菌方面也有明显效果.XF32-22菌株在食品保鲜和农业生物防治方面具有很好的应用前景.
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