扩展青霉脂肪酶K56R叠加突变对热稳定性的影响

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目的:扩展青霉脂肪酶随机突变体ep8是一株热稳定性比野生型有所提高的突变体。获得热稳定性提高的优良菌株。方法:在ep8的基础上利用重叠延伸PCR构建叠加突变重组质粒pPIC3.5K-ep8-K56R,将该质粒电转毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115进行异源表达。结果:该叠加突变脂肪酶在毕赤酵母中获得了活性表达。15%SDS-PAGE结果分析表明突变脂肪酶PEL-ep8-K56R-GS分子量与野生型PEL-GS一致,约为28kDa。叠加突变脂肪酶在37℃时酶活为852U/mL、野生型为760
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