【摘 要】
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扩增子测序是目前用来衡量微生物多样性时,使用最广泛的测序手段。因为其扩增的需要,所以选择合适的特定引物是必须的,且其对结果影响甚大。probeBase是目前最常用的记录了人工
【机 构】
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暨南大学附属第一医院生物医学转化研究院; 中国科学院深圳先进技术研究院深圳合成生物学创新研究院中国科学院定量工程生物学重点实验室;
【基金项目】
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广东省自然科学基金-博士启动纵向协同(2017A030310179);国家自然科学基金面上项目(32070121);“111”项目(B16021)
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扩增子测序是目前用来衡量微生物多样性时,使用最广泛的测序手段。因为其扩增的需要,所以选择合适的特定引物是必须的,且其对结果影响甚大。probeBase是目前最常用的记录了人工校正后的rRNA探针和引物的数据库。然后,我们发现probeBase中63.58%的引物存在不同程度的注释错误,包括命名重复、命名无规律以及匹配位置错误等。更严重的是,目前主流的短命名方式不具有唯一性,导致对应关系模糊不清。因此,我们定义了更简单可行的短命名标准并开发了新的引物科学命名数据库(DPSN),并对probeBase里的所有173个引物进行了校正,并新加入了4个新的改良引物以及38个针对大亚基的新引物。新的短命名规则包含3个基本要素:在正链5’端的位置,版本号和方向。此外在前面加入了识别大/小亚基以及主要针对的菌界的标志。使用DPSN,可以快速查找感兴趣区域对应的引物并比较不同版本的差异选择合适的引物。同时还能建立命名与序列的明确一一对应关系,避免歧义。
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