肺炎链球菌ciaH基因与β-内酰胺类抗生素耐药的相关性研究

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:y886520520886
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 

构建肺炎链球菌ciaH基因敲除(ΔciaH)突变株,了解肺炎链球菌二元信号系统CiaH/CiaR中ciaH基因与β-内酰胺类抗生素耐药的相关性。

方法 

采用PCR扩增肺炎链球菌ATCC6306株ciaH基因片段,T-A克隆后测序。构建用于敲除ciaH基因的自杀质粒pEVP3ciaH,CaCl2法将其转化入肺炎链球菌ATCC6306株,通过同源重组、插入失活及氯霉素筛选获得肺炎链球菌ATCC6306株ciaH基因敲除突变株ΔciaH。采用PCR、测序及激光共聚焦显微镜法对ΔciaH突变株进行鉴定。采用二倍琼脂稀释法测定并比较青霉素G(PCN)或头孢噻肟(CTX)对ΔciaH突变株和野生株最低抑菌浓度(MIC)及其差异。采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测1/4 MIC PCN或CTX作用前后ciaH-mRNA水平变化。

结果 

PCR和测序结果显示,所构建的ΔciaH突变株染色体DNA中ciaH基因被插入失活;免疫荧光法检测结果显示,ΔciaH突变株不表达CiaH蛋白。PCN和CTX对ΔciaH突变株MIC分别为32 μg/ml和64 μg/ml,明显高于野生株的0.06 μg/ml和1 μg/ml(P<0.01)。1/4 MIC PCN或CTX作用后,肺炎链球菌ciaH-mRNA水平显著升高(P<0.01)。

结论 

肺炎链球菌CiaH/CiaR二元信号系统中CiaH与其对β-内酰胺类抗生素耐药性有关。

其他文献
本文探索了基于涡旋辅助分散液液微萃取(VDLLME)的新型样品前处理技术,结合气相色谱-氮磷检测器(GC/FPD)分析,建立同时检测蔬菜中24种有机磷农药残留的方法。方法简单实用,仅需一步提
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
期刊
纪永波  个人简介  年龄,47,性别,男,最高学历,大学本科,学科专业方向,油气集输,职称,学位,高级工程师,学士学位,所在单位,中国石油集团工程设计有限责任公司北京分公司,职务,主任工程师
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
期刊
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
期刊
目的 探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)吡嗪酰胺(pyrazinamide, PZA)耐药表型与耐药相关基因pncA的关系,对未发现pncA突变的菌株进行panD、rpsA基因分析。方法 采用MGIT960仪器法检测108株结核分枝杆菌临床分离株对一线抗结核药物(包括PZA)的敏感性,采用PCR DNA测序技术对菌株进行16S rDNA和pncA、pa
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
设计了一种功率器件为IGBT,10KW,40KHZ正弦波镀膜电源主电路采用移相全桥,输出滤波电路采样LLCC4阶功率变换电路。?通过用状态空间平均法建立LLCC功率变换电路的小信号模型,推导