重组猪轮状病毒VP7表达载体的构建与免疫原性分析

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zp_3000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
猪轮状病毒(Porcine rotavirus, PoRV)是呼肠孤病毒科,轮状病毒属的成员,本属病毒在世界范围普遍流行,是流行广泛的人兽共患病。目前,研制安全有效的疫苗是控制轮状病毒感染的重要手段之一。本研究旨在对猪轮状病毒VP7蛋白在粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)的表达,并鉴定其免疫学特性。首先根据GenBank中发表的VP7全序列(NC011503.2)设计引物,从含VP7的G-2质粒中扩增目的片段,建立融合表达载体pESP-2-VP7的重组酵母工程菌。异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-Dthiogalactoside, IPTG)可诱导表达谷胱甘肽S转移酶(glutathione-S-transferase, GST)-VP7融合蛋白,后将发酵工艺条件优化后的融合蛋白GST-VP7分离纯化并免疫小鼠(Mus musculus),进行免疫原性的分析。结果显示,克隆的VP7基因与预计的糖蛋白基因大小一致,并在酵母菌中表达了分子质量约61 k D重组蛋白,再经发酵工艺条件优化后,获得蛋白浓度达0.99 mg/mL。小鼠免疫的实验结果表明,免疫2周后,滴鼻组(in the nasal drip, IN)和肌注组(intramuscular injection, IM)的小鼠免疫球蛋白G (immunoglobulin G, IgG)抗体几何平均滴度分别达到680和495,滴鼻组分泌型免疫球蛋白A (secretory immunoglobulin A,SIgA)平均几何滴度达到43.5,可以产生高水平的γ-干扰素(γ-interferon, IFN-γ),表明了VP7蛋白免疫对诱导机体产生细胞免疫有一定的效果。本研究对VP7蛋白的真核表达和该蛋白的后续研究提供了条件;该蛋白免疫原性的研究为轮状病毒诊断抗原及相关疫苗的探索提供了基础资料。
其他文献
液态沥清是建筑施工中常用的材料.目前一些施工单位,一般均采用敞口大锅或废旧油桶来熔化沥清,使沥清蒸气、烟尘直接排放到大气中.排放出的沥清蒸气和烟尘是含有多种化学物质
三、高度的幻真性 人们在读聊斋中花妖狐鬼故事时,明知其假,但又深感其真,历代一些评论家都有如此感受。清·冯镇峦说过:“虽说鬼谈狐,如华严楼阁,弹指即现,如未央宫阙,
《大学英语教学大纲(修订本)》(以下简称《大纲》)明确提出,要求非英语专业专科学生在“译的能力”上要“掌握英译汉的基本方法和技巧,借助工具书能将与课文难度相当的英语译
这篇文章选译自苏联国家文学出版社1956年版《批评论文集》中《巴札洛夫与沙宁》.(题目是译者另加的)作者B.B.活罗夫斯基(1871——1923)是俄国著名的革命家和文学批评家.他和