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目的 探讨制备的具有被动靶向和主动靶向肝癌双重作用的多柔比星(DOX)偶联嵌段共聚物纳米胶束的表征和体外抗肿瘤作用.方法 采用化学方法共价偶联DOX和聚乳酸-羟基乙酸-聚乙二醇(PLGA-PEG)嵌段共聚物,合成DOX-PLGA-PEG,应用傅里叶变换红外光谱学和磁共振法验证酰胺键是否形成.利用透析法,在水相中自组装形成DOX-PLGA-PEG纳米胶束.通过物理吸附法,将肝癌特异性抗体HAb18 F(ab)2修饰至DOX-PLGA-PEG胶束,即靶向胶束.采用动态光散射法,使用粒度分析仪研究纳米胶束粒径大小及分散范围.扫描电镜观察胶束形态.紫外分光光度法测定DOX-PLGA-PEG胶束或靶向胶束载药率、包封率,并行模拟体外释药实验.相差显微镜下观察2 mg/ml DOX-PLGA-PEG胶束或靶向胶束作用后肝癌HepG2和Huh7细胞形态变化;应用平板克隆形成实验分析1 mg/ml DOX-PLGA-PEG胶束或靶向胶束作用后细胞存活情况.结果 应用红外光谱观察到在波数1575 cm-1处出现一波峰,符合酰胺键波峰的位置,即酰胺键连接DOX的伯胺基和PLGA-PEG的末端羟基后合成DOX-PLGA-PEG.DOX-PLGA-PEG胶束和靶向胶束的粒径分别为(55.0±6.3)nm和(87.6±9.3)nm,多分散指数分别为0.098和0.142.扫描电镜观察发现纳米胶束呈圆球形,表面平滑.DOX-PLGA-PEG胶束和靶向胶束的载药率分别为(2.4±0.2)％和(2.2±1.9)％,包封率分别为(91.7±5.3)％和(87.5±4.8)％.DOX-PLGA-PEG胶束和靶向胶束的模拟体外释药曲线呈双相:在爆发释放之后为缓慢释放,5 d内DOX释药率约为30％,6 h内释药率为25％.2 mg/ml DOX-PLGA-PEG胶束或靶向胶束作用后,肝癌HepG2和Huh7细胞形态均发生损伤性改变,部分细胞死亡,克隆形成能力降低;靶向胶束较DOX-PLGA-PEG胶束作用明显.1 mg/ml DOX-PLGA-PEG胶束和靶向胶束作用后,HepG2和Huh7细胞存活率均随时间下降,且靶向胶束较DOX-PLGA-PEG胶束效果明显(均P<0.05).DOX-PLGA-PEG胶束和靶向胶束对于Huh7细胞50％有效抑制分别出现在给药后2.4、5.5 d,DOX释放浓度分别为1.15、1.24μg/ml;DOX-PLGA-PEG胶束和靶向胶束对于HepG2细胞的50％有效抑制分别出现在给药后3.3、7.4 d,DOX释放浓度分别为1.20、1.31μg/ml.结论 构建的被动靶向和主动靶向双重作用的DOX纳米胶束体外可大量释放活性药物,对肝癌HepG2和Huh7细胞增殖有明显抑制作用.