与Rab2互作布鲁菌株效应蛋白HSP70的鉴定

来源 :扬州大学学报(农业与生命科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaoyao2000

【摘要】

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以Rab2作为诱饵钓取布鲁菌效应蛋白，通过RT—PCR获得鼠Rab2基因，利用基因克隆方法构建表达载体pGEX-4T-1-Rab2及其2个突变体pGEX-4T-1-Rab2[N119I]和pGEX-4T-1-Rab2[Q65L]；然后I

【作者】

：

崔桂梅魏盼赵玉玺潘垒昌徐晓晗彭其胜

【机构】

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吉林大学人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室

【出处】

：

扬州大学学报(农业与生命科学版)

【发表日期】

：

2014年2期

【关键词】

：

布鲁菌 Rab2 效应蛋白 HSP70

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目(31372409)

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以Rab2作为诱饵钓取布鲁菌效应蛋白，通过RT—PCR获得鼠Rab2基因，利用基因克隆方法构建表达载体pGEX-4T-1-Rab2及其2个突变体pGEX-4T-1-Rab2[N119I]和pGEX-4T-1-Rab2[Q65L]；然后IPTG诱导GST—Rab2、GST—Rab2[N119I]和GST-Rah2[Q65L]融合蛋白的表达，使用琼脂糖亲和介质分离纯化融合蛋白；最后将纯化的融合蛋白与超声破碎的野生布鲁菌或Avirb2缺失布鲁菌株上清互作，利用SDS-PAGE电泳和银染确定差异蛋白，质谱分析差异

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