金黄色葡萄球菌fnbA和fnbB基因及fnbAB双基因缺失突变体菌株的构建

来源 :徐州医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:whansiyu
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目的 构建纤维连接蛋白结合蛋白 ( FnbP)基因fnbA、fnbB及fnbAB基因敲除质粒并构建相应基因缺失金黄色葡萄球菌菌株。方法 提取金黄色葡萄球菌NCTC8325菌株的基因组,以合成的含有GGGG-attB1的基因特异性序列为引物,采用PCR技术分别扩增目的基因片段,应用Gateway基因克隆技术,通过BP反应与含有attP1和attP2的pKOR1质粒载体混合,在attB和attP之间发生位点特异性重组,构建成含有fnbA 、fnbB和fnbAB基因敲除质粒,再电转到金黄色葡萄球菌菌株NCTC8
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