【摘 要】
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目的:通过慢性肾衰竭大鼠血清对肾小管上皮细胞多药耐药蛋白表达影响的研究,探讨慢性肾衰竭肾小管上皮细胞功能改变的部分分子机制.方法:体外培养小鼠原代肾小管上皮细胞,分
【机 构】
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浙江中医药大学附属广兴医院(杭州市中医院)肾病实验室,杭州,310007;
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目的:通过慢性肾衰竭大鼠血清对肾小管上皮细胞多药耐药蛋白表达影响的研究,探讨慢性肾衰竭肾小管上皮细胞功能改变的部分分子机制.方法:体外培养小鼠原代肾小管上皮细胞,分别用含1.0%,2.5%,5.0%的5/6肾切除的慢性肾衰竭大鼠血清和正常对照大鼠血清的培养液培养,72 h后收集细胞,提取膜蛋白.用West-blotting检测多药耐药蛋白(P-glycopmtein,P-gp)、多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)和内参5-nucleotidase的蛋白表达.用Bio-Rad Quantity One凝胶分析系统对条带进行半定量分析.结果:(1)血清浓度相同的情况下,慢性肾衰竭大鼠血清刺激可较对照血清增强肾小管上皮细胞P-gp的表达,在血清为1.0%时,有统计学意义;而各个浓度的肾衰竭血清刺激细胞MRP2的表达均较正常对照血清显著增高,具有统计学意义.(2)无论对照血清还是慢性肾衰竭血清,随着血清浓度的降低,两种耐药蛋白的表达均逐渐增高.P-gp表达在1.0%血清干预的细胞和5.0%、2.5%血清之间,有统计学意义;而MRP2的表达在各个浓度之间均有统计学意义.结论:血清成分或浓度可改变肾小管上皮细胞P-gp和MRP2的表达,其机制和作用有待进一步研究.
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