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采用基因定位突变的方法，在体外把来自ｐＢＲ３２２的四环素抗性基因片段插入由ｐＳＴ１１４２质粒所携带的阴沟肠杆菌ｎｉｆＬ基因３－端的ＳｍａⅠ位点、再经细胞体内同源基因片段的重组交换，选择获得了在染色体上ｎｉｆＬ突变的阴不直菌Ｅ１２和Ｅ１３，两者Ｔｃ＾ｒ基因插入ｎｉｆＬ的转录方向相反。经分析显示，Ｅ１３（ｎｉｆＬ）由于Ｔｃ＾ｒ基因插入后，在ｎｉｆＡ上 生具有启动子核苷酸序列（－ＴＴＴＣＡＴＡ－），激活