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建立以乙醇／（NH4）2SO4组成的双水相萃取体系分离纯化尿激酶的新途径。通过研究双水相萃取系统的各种影响因素：乙醇／（NH4）2S04的组成比例、pH、无机盐的加入、粗酶的浓度等，探索以乙醇／（NH4）2SO4组成的双水相萃取体系纯化尿激酶的最佳条件。研究结果表明：双水相萃取系统冰乙醇体积分数为65％，（NH4）2SO4质量分数为10％，pH8．0，酶加入量为30％，且不加入任何其他无机盐的条件下，尿激酶的纯化倍数可达到9．0倍，回收率最高达92％。