【摘 要】
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目的构建含有Bikunin的哺乳类细胞表达载体pSecTag2B-Bikunin,应用哺乳类细胞表达系统,表达分泌型Bikunin融合蛋白。方法用RT-PCR方法,从人肝细胞系L02扩增Bikunin编码区序列
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第一医院普外科,哈尔滨医科大学附属第四医院血液科,南京大学生命科学院
【基金项目】
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黑龙江省教育厅海外学人科研资助项目（1055HQ017）
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目的构建含有Bikunin的哺乳类细胞表达载体pSecTag2B-Bikunin,应用哺乳类细胞表达系统,表达分泌型Bikunin融合蛋白。方法用RT-PCR方法,从人肝细胞系L02扩增Bikunin编码区序列,将其克隆于pMD18-T Simple Vector中构建pMD18-T-Bikunin,经酶切、PCR及测序鉴定后,将Bikunin亚克隆至哺乳类细胞表达载体pSecTag2B中。用磷酸钙法转染NIH3T3细胞,24 h后,Western blot检测浓缩25倍的细胞培养上清中融合蛋白的表达。结
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