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目的
观察左氧氟沙星对大鼠骨髓间充质干细胞是否具有细胞毒性作用。
方法采用大鼠骨髓间充质干细胞,设立正常对照组及梯度浓度的左氧氟沙星处理组(5、10、20、40、80 μg/ml)分别作用24、48 h。以噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,流式细胞膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙锭(PI)双染法检测细胞凋亡情况,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测对细胞基质促降解的基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及抑制降解的基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶抑制因子-13(TIMP-3)的mRNA水平的表达。
结果左氧氟沙星(5~80 μg/ml)作用48 h后,骨髓间充质干细胞细胞数分别减少至对照组的92.39%、88.26%、84.11%、78.71%和71.90% Annexin V-FITC/PI双染流式细胞检测示,左氧氟沙星(5~80 μg/ml)作用24 h后,细胞凋亡细数呈药物浓度依耐性升高(与对照组比较其P值分别为0.022、0.013、0.007、0.004、0.002)。RT-PCR检测结果示,左氧氟沙星作用细胞24 h后,显著增高MMP-3(与对照组比较,P值分别为0.025、0.021、0.014、0.002、0.001)和显著增高MMP-13(与对照组比较,P值分别为0.015、0.009、0.004、0.003、0.001)表达,显著降低TIMP-1表达,并且该作用具有药物浓度依耐性(与对照组比较,P值分别为0.027、0.015、0.007、0.005、0.001)。
结论左氧氟沙星对大鼠骨髓间充质干细胞具有明确的细胞毒性作用。