【摘 要】
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目的 探讨鹿茸蛋白对缺血缺氧诱导心肌细胞凋亡的作用及其机制.方法 将SD大鼠心肌细胞适应性培养后分为对照组,模型组,鹿茸蛋白低剂量组(0.25 mg/mL)、中剂量组(0.5 mg/mL)、
【机 构】
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中日友好医院中西医结合心内科 北京100029;北京中医药大学研究生院 北京100029;北京协和医学院药物研究所 北京100050;中日友好医院临床药学部 北京100029
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目的 探讨鹿茸蛋白对缺血缺氧诱导心肌细胞凋亡的作用及其机制.方法 将SD大鼠心肌细胞适应性培养后分为对照组,模型组,鹿茸蛋白低剂量组(0.25 mg/mL)、中剂量组(0.5 mg/mL)、高剂量组(1 mg/mL)和鹿茸蛋白高剂量+LY294002[PI3K抑制剂(10 μmol/L)]组并置于相应培养基培养36 h,模型组和用药组进行缺氧处理.采用AnnexinV-fluorescein Isothiocyanate(FITC)/Propidum Iodide(PI)检测心肌细胞的凋亡情况;应用JC-1荧光探针检测心肌细胞线粒体膜电位改变情况;WesternBlot检测Akt、p-Akt、Bcl-2、Bax和cleaved-Caspase3蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组心肌细胞凋亡加重,正常细胞减少,晚期凋亡细胞增加,心肌细胞线粒体膜电位降低,心肌细胞Bax和cleaved-Caspase3蛋白的表达增加,p-Akt和Bcl-2蛋白表达下降(P ＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,用药组晚期凋亡细胞数量下降(P＜0.01),各用药组之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05);用药组心肌细胞线粒体膜电位升高(P＜0.01);鹿茸蛋白高剂量组细胞Bax和cleaved-Caspase3表达下降,p-Akt和Bcl-2的表达增加(P＜0.01),鹿茸蛋白高剂量+ LY294002组各蛋白表达无明显变化(P＞0.05).结论 鹿茸蛋白可能通过调控PI3K/Akt信号通路下游凋亡相关蛋白减轻缺血缺氧对心肌细胞造成的损伤,维持细胞线粒体膜电位稳定性,减少细胞凋亡.
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