【摘 要】
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目的 应用重组腺病毒载体介导的趋化素样因子1(CKLF1)基因转染大鼠血管平滑肌细胞(SMC),观察CKLF1对SMC内核因子(NF)-κB活性的影响.方法 用腺病毒介导的CKLFl以不同时间梯度
【机 构】
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北京大学人民医院血管外科,北京大学药学院分子与细胞药理学系
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目的 应用重组腺病毒载体介导的趋化素样因子1(CKLF1)基因转染大鼠血管平滑肌细胞(SMC),观察CKLF1对SMC内核因子(NF)-κB活性的影响.方法 用腺病毒介导的CKLFl以不同时间梯度转染刺激SMC,采用免疫细胞化学、荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot 等方法 分析细胞内CKLF1和NF-κB激活表达.结果 静息状态下SMC中NF-κB有基础表达量,经CKLF1刺激后2～14 d,其活性迅速增加,免疫细胞化学染色细胞质和核呈棕色,CKLF1荧光定量PCR和Western blot结果 分别为1.0500±0.0681、3.3090±0.1523、2.8540±0.1219、1.7050±0.0944、1.4350±0.0858和1.186±0.061、2.264±0.185、2.397±0.149、1.617±0.101、1.381±0.033,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).NF-κB的Western blot结果 为1.184±0.111、2.046±0.221、1.747±0.068、1.498±0.051、1.412±0.087,与对照组比较5～14 d差异有统计学意义(P＜0.05).两组刺激后5～8 d为表达高峰期,且NF-κB活性与CKLF1表达量间明显相关.结论 CKLF1可导致NF-κB表达增加并随刺激时间梯度改变,提示NF-κB信号通路可能参与了CKLF1对SMC的增殖和迁移作用.
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