锰诱导体外培养耳蜗毛细胞的损伤与凋亡研究

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目的探讨锰诱导体外培养耳蜗毛细胞损伤与凋亡的关系。方法将出生3天的新生Sprague Dawley大鼠的耳蜗器官体外培养,将贮存浓度为100m M氯化锰用SFM稀释到终浓度为1m M,3m M,5m M后进行体外染毒处理耳蜗基底膜。应用鬼笔环肽染色特异性显示耳蜗毛细胞的静纤毛,同时用β-Tubulin对神经纤维进行染色,用TUNEL试剂盒;Cleaved caspase-3抗体对耳蜗基底膜进行染色,在激光共聚焦显微镜下分别观察耳蜗基底膜的毛细胞,神经纤维。结果耳蜗基底膜培养24小时,1m M氯化锰对耳蜗毛
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