目的 观察RNA干扰抑制Eph受体酪氨酸激酶A7(EphA7)基因对肝癌细胞株SMMC-7721生物学特性的影响.方法 EphA7小干扰RNA重组质粒采用脂质体介导法转染肝癌细胞株SMMC-7721,并设空载体转染组和未转染组.采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测转染干扰载体后肝癌细胞株SMMC-7721中EphA7 mRNA和蛋白的表达,噻唑蓝(MTT)比色法检测转染后细胞增殖能力的变化,流式细胞仪检测转染后细胞周期分布的改变,Transwell小室侵袭实验检测转染后对其体外侵袭能力的影响.结果 与空载体转染组(0.429 3±0.053 3、0.582 2±0.029 1)和未转染组(0.431 1 ±0.0410、0.583 2±0.015 4)比较,EphA7小干扰RNA(siRNA)可显著下调肝癌细胞株SMMC-7721中EphA7 mRNA (0.191 1±0.015 3、0.148 8±0.0199和0.0874 ±0.0123)和蛋白(0.278 6±0.039 2、0.301 1 ±0.0372和0.2142±0.0147)的表达(P＜0.05).MTT法绘制生长曲线显示,转染组肝癌细胞株SMMC-7721增殖速度明显低于空载体转染组和未转染组(P＜0.05).流式细胞检测结果显示EphA7 siRNA对肝癌细胞株SMMC-7721生长周期中G1、G2和S期的细胞分布比例无明显影响(P＞0.05).Transwell小室侵袭实验发现,转染组肝癌细胞株SMMC-7721穿膜细胞计数[(27.00±5.57)、(13.40±3.43)和(23.60 ±3.65)个]明显低于空载体转染组[(68.60±6.50)个]和未转染组[(72.00±9.30)个],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 抑制EphA7基因可降低肝癌细胞株SMMC-7721的增殖活性及体外侵袭能力,EphA7可能在肝癌的恶性转化、侵袭和转移过程中发挥重要作用。
抑制Eph受体酪氨酸激酶A7基因对肝癌细胞SMMC-7721生物学特性的影响
【摘 要】
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目的 观察RNA干扰抑制Eph受体酪氨酸激酶A7(EphA7)基因对肝癌细胞株SMMC-7721生物学特性的影响.方法 EphA7小干扰RNA重组质粒采用脂质体介导法转染肝癌细胞株SMMC-7721,并设空载体转染组和未转染组.采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测转染干扰载体后肝癌细胞株SMMC-7721中EphA7 mRNA和蛋白的表达,噻唑蓝(
【机 构】
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450052郑州大学第一附属医院肝胆胰外科河南省肝胆胰外科与消化器官移植重点学科开放实验室,450052郑州大学第一附属医院肝胆胰外科河南省肝胆胰外科与消化器官移植重点学科开放实验室,450052郑州
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2014年31期
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