【摘 要】
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目的 探讨白藜芦醇对动脉粥样硬化（AS）中血管钙化的影响及机制。方法 将雄性健康SD大鼠随机分为对照组、模型组、白藜芦醇(5 mg·kg-1)组,每组10只。造模前ip预给药21 d,每天1次。模型组、白藜芦醇组均制备AS模型:sc 5 mg·kg-1维生素D35 d后,分离并结扎左颈动脉,0.12 mmol·L-1的CaCl2溶液湿敷30 min,随即缝合,对照组湿敷生理盐水。造模后继续给药,1
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（8207131747）； 湖北省卫生健康委中医药科研立项项目（ZY2021F007）；
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目的 探讨白藜芦醇对动脉粥样硬化（AS）中血管钙化的影响及机制。方法 将雄性健康SD大鼠随机分为对照组、模型组、白藜芦醇(5 mg·kg-1)组,每组10只。造模前ip预给药21 d,每天1次。模型组、白藜芦醇组均制备AS模型:sc 5 mg·kg-1维生素D35 d后,分离并结扎左颈动脉,0.12 mmol·L-1的CaCl2溶液湿敷30 min,随即缝合,对照组湿敷生理盐水。造模后继续给药,1周后所有大鼠同时禁食24 h后处死,取大鼠左颈动脉进行苏木精-伊红（HE）染色和Von Kossa染色。体外钙化培养基诱导CRL-1999细胞钙化,给予白藜芦醇(10μmol·L-1)干预,茜素红S染色检测钙盐沉积;实时荧光定量PCR （qRT-PCR）和Western blotting法检测钙化指标骨形态发生蛋白-2 （BMP2）、侏儒相关转录因子2 （Runx2）,炎性小体NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 （NLRP3）,细胞焦亡相关指标天冬氨酸蛋白水解酶-1 （Caspase-1）、Gasdermin-D （GSDMD）、白细胞介素（IL）-1β、IL-18蛋白和mRNA表达变化;免疫荧光检测Runx2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白表达;分子对接验证白藜芦醇与靶蛋白NLRP3、Caspase-1、GSDMD、BMP2、Runx2结合活性。结果 HE与VonKossa染色显示模型组血管壁结构紊乱、钙盐沉积,白藜芦醇缓解钙盐沉积。体外实验表明钙化结节可被白藜芦醇缓解;与对照组比较,模型组BMP2、Runx2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18 mRNA和蛋白表达均显著上升（P＜0.05、0.01、0.001）;经白藜芦醇处理后,上述指标的mRNA和蛋白表达均显著下降（P＜0.05、0.01、0.001）。白藜芦醇与Runx2、NLRP3分别形成2、3个氢键,对接活性较好。结论 白藜芦醇抑制AS中血管钙化,机制可能与抑制NLRP3/Caspase-1信号通路,进而抑制细胞焦亡有关。
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