γ-羟基膦酸酯诱导梭曼水解单链抗体酶

来源 :中国科学(B辑 化学) | 被引量 : 4次 | 上传用户:mdtuyen
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新型半抗原3-羟基-1-对硝基苯基甲磷酸单频哪基酸酯(P_6),与血蓝蛋白结合后(P_6-LPH)免疫小鼠,从小鼠脾细胞出发构建单链抗体cDNA文库和噬菌体表面呈现文库.用固相化抗原 P_6-BSA对噬菌体抗体库进行了 4轮淘选,从中筛选到11株对梭曼水解有催化作用的单链抗体.对其中一株(EP_6)进行可溶性抗体的制备,经凝胶过滤和离子交换层析纯化后,SDS-PAGE为 31ku的单一条带.酶动力学常数测定其对梭曼水解的催化常数为k_(cat)=198min~(-1),K_cat/K_uncat=1
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