探讨尿酸在诱导前列腺上皮RWPE-1细胞发生炎性反应中的作用及其作用机制。
方法浓度分别为0、8、12、16 mg/dl的尿酸处理前列腺上皮细胞RWPE-1细胞，倒置显微镜观察RWPE-1细胞的生长及形态学变化；Western blot方法检测RWPE-1细胞内Toll样受体4(TLR- 4)、核转录因子-κBp65(NF-κBp65)、κB抑制蛋白激酶α(IKKα)、κB抑制蛋白激酶β(IKKβ)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性蛋白的表达变化；实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测IKKα、IKKβ、NLRP3、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)的mRNA表达变化；酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化。
结果倒置显微镜观察显示，RWPE-1细胞形态学变化与尿酸作用具有浓度依赖关系；RWPE-1细胞中TLR4、NF-κBp65、IKKα、IKKβ、NLRP3炎性蛋白的表达水平随尿酸浓度的增高而增高，呈正相关(P<0.05)；随着尿酸的浓度升高，IKKα、IKKβ、NLRP3、Caspase-1基因的表达呈上调趋势，呈正相关(P<0.05)；尿酸刺激RWPE-1细胞12 h后，各组(0、8、12、16 mg/dl)TNF-α含量分别为：(9.69±0.22)、(9.56±0.47)、(9.63±0.51)、(10.08±0.11) ng/L，IL-1β分别为：(7.75±0.52)、(7.85±0.87)、(9.27±1.11)、(9.62±0.44) ng/L，差异无统计学意义(P>0.05)；24 h后各组TNF-α分别为：(24.86±0.61)、(25.14±0.83)、(30.34±0.61)、(30.77±1.84) ng/L，IL-1β分别为：(14.81±0.23)、(15.53±0.30)、(22.87±0.65)、(25.60±0.70) ng/L；48 h后各组TNF-α分别为：(26.72±0.37)、(26.80±1.14)、(31.60±0.76)、(42.98±1.49) ng/L，IL-1β分别为：(25.36±0.70)、(30.29±0.62)、(38.91±1.52)、(40.97±1.17) ng/L，尿酸处理24、48 h后，高浓度尿酸促进了RWPE-1细胞中IL-1β和TNF-α的分泌(P<0.05)。
结论尿酸可以诱导前列腺上皮RWPE-1细胞发生炎性反应，而激活TLR4/NF-κB和NLRP3/Caspase- 1信号通路是其机制之一。