观察研究内质网应激(ERS)在糖尿病膀胱(DCP)逼尿肌病变发生进展过程中的效应及其机制。
方法以链脲佐菌素(STZ)构建并鉴定糖尿病大鼠模型，在4、8、12和16周观察电镜下逼尿肌细胞(DSMCs)超微结构，用苦味酸酸性复红法(VG染色法)测逼尿肌胶原纤维所占面积比例，链霉亲和素-生物素复合物法(SABC法)测DSMCs细胞增殖核抗原(PCNA)表达，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL法)测DSMCs凋亡水平；实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及Western blot法测ERS相关性凋亡标志因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-12在mRNA及蛋白水平的表达。
结果DSMCs超微结构随病程进展渐出现核旁内质网区域脱颗粒及空泡化，伴正常结构破坏。除DM4W组[(8.02±0.43)%]外，DM8W组[(13.38±2.65)%]、DM12W组[(18.14±1.93)%]、DM16W组[(19.71±3.05)%]逼尿肌胶原纤维面积比例与对照组[(7.86±0.72)%]比较均显著升高(P<0.05)；各实验组PCNA平均阳性表达率随病程进展均显著升高[(20.34±4.55)%、(46.88±7.12)%、(39.78±1.93)%、(22.15±5.64)%比(16.26±2.43)%，P<0.05]，在8周达峰；各实验组大鼠平均凋亡指数(AI)均逐渐升高[(17.12±2.78)%、(28.12±4.09)%、(28.12±4.09)%、(43.39±6.82)%比(6.32±1.23)%，P<0.05]。GRP78、Caspase-12及CHOP的mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05)，其中Caspase-12及CHOP表达随病程进展均逐渐升高，而GRP78的mRNA表达于12周达峰，其蛋白表达于8周达峰。
结论糖尿病膀胱逼尿肌组织形态、超微结构及细胞数量变化呈现时间依赖性，其病情进展与ERS相关性凋亡密切相关。