UHS-拟蜘蛛拖丝蛋白基因转染小鼠成纤维细胞及其鉴定

来源 :江西农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yinxiaoyi5858

【摘要】

：

为了获得转拟蜘蛛拖丝蛋白基因2S的阳性小鼠成纤维细胞,本研究将前期工作中人工合成的拟蜘蛛拖丝蛋白基因2S和克隆获得的小鼠超高硫角蛋白启动子（UHS）,与带有IRES序列和GFP报告

【作者】

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王春生李晶宁方勇张秋婷梁洋朴善花安铁洙

【机构】

：

东北林业大学生命科学学院,东北农业大学动物科技学院

【出处】

：

江西农业大学学报

【发表日期】

：

2011年6期

【关键词】

：

蜘蛛拖丝蛋白基因二聚体超高硫角蛋白启动子真核表达载体小鼠成纤维细胞转基因 polymerized spider dragline silk protei

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（30771538、31000990）, 国家转基因生物新品种培育科技重大专项（2009ZX08008-004B）

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为了获得转拟蜘蛛拖丝蛋白基因2S的阳性小鼠成纤维细胞,本研究将前期工作中人工合成的拟蜘蛛拖丝蛋白基因2S和克隆获得的小鼠超高硫角蛋白启动子（UHS）,与带有IRES序列和GFP报告基因的表达载体连接,构建真核表达载体UHS-2S-pIRES2-EGFP;将UHS-2S-pIRES2-EGFP线性化后,采用脂质体法转染小鼠皮肤成纤维细胞,通过G418筛选获得neo基因抗性阳性细胞。结果表明：（1）成功构建UHS-2S-pIRES2-EGFP;（2）转基因细胞的最佳G418筛选浓度为400μg/mL;（3）筛

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