【摘 要】
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为了筛选出针对细胞粘附分子P—selectin的特异性抗体,克隆了P—selectin功能性基因片段,使其通过糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定表达于真核细胞的细胞膜上,以用作筛选的抗原。提取人
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为了筛选出针对细胞粘附分子P—selectin的特异性抗体,克隆了P—selectin功能性基因片段,使其通过糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定表达于真核细胞的细胞膜上,以用作筛选的抗原。提取人血小板的总RNA,RT-PCR扩增出P—selectin目的基因片段,同时用重叠延伸PCR的方法合成细胞膜锚定信号肽GPI基因;将二者按上下游M页序插入含有弱化neo基因的真核表达载体pMCEw2中;并将构建的重组质粒pMCEw2-GPI—P-selectin转染CHOdhfr细胞,G418筛选获得阳性细胞株,利用EL
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