【摘 要】
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将Brevibacillus brevis US575角蛋白酶基因kerUS进行密码子优化,并在毕赤酵母GS115中表达,以提高角蛋白酶产量。结果表明:优化的基因可在毕赤酵母中成功表达,重组角蛋白酶的
【机 构】
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华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,湖北师范大学生命科学学院/食用野生植物保育与利用湖北省重点实验室
【基金项目】
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湖北省自然科学基金项目(2015CFC797);湖北省教育厅中青年人才项目(Q20162501)
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将Brevibacillus brevis US575角蛋白酶基因kerUS进行密码子优化,并在毕赤酵母GS115中表达,以提高角蛋白酶产量。结果表明:优化的基因可在毕赤酵母中成功表达,重组角蛋白酶的分子质量约30 ku,最佳反应条件为pH 9.5和60℃,1 mmol/L的Mn^2+、Ba^2+对角蛋白酶活性有促进作用。此外,重组角蛋白酶易降解干酪素和β角蛋白(羽毛粉),酶促反应最大速度v max=0.019 g/(L·min),Km=4.64 g/L,比活力=440/mg。研究获得的产角蛋白
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