【摘 要】
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目的 探讨曲古霉素A(TSA)通过调控Ku70乙酰化水平对结肠癌HCT116细胞上皮间充质转化(EMT)和侵袭转移的影响.方法 体外培养HCT116细胞,采用MTT法筛选并确定TSA的最佳给药浓度;
【机 构】
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解放军总医院第八医学中心药剂科,北京 100091;空军军医大学唐都医院肿瘤科,西安 710038;西北工业大学生命学院,西安,710072;解放军总医院第八医学中心药剂科,北京,100091
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目的 探讨曲古霉素A(TSA)通过调控Ku70乙酰化水平对结肠癌HCT116细胞上皮间充质转化(EMT)和侵袭转移的影响.方法 体外培养HCT116细胞,采用MTT法筛选并确定TSA的最佳给药浓度;采用Western印迹(WB)检测对照组(DMSO处理组)和TSA处理组细胞中Ku70及其乙酰化水平以及EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(cad-herin)、N-钙黏蛋白、Snail和Slug的表达情况;采用Transwell-迁移和侵袭实验观察TSA介导Ku70乙酰化对HCT116细胞侵袭和转移能力的影响.结果 MTT检测结果表明TSA可明显降低HCT116细胞的活性(P<0.05);WB结果显示,TSA可明显上调HCT116细胞中acetyl-Ku70的蛋白水平并抑制其EMT,表现为上调上皮细胞标志蛋白E-钙黏蛋白的表达,并下调EMT标志蛋白N-钙黏蛋白及EMT相关转录因子Snail和Slug的表达(P<0.05);此外,Transwell-迁移和侵袭实验结果表明,TSA可明显抑制HCT116细胞的迁移和侵袭(P<0.05).结论 TSA可能通过上调HCT116细胞中Ku70乙酰化水平,降低Ku70与DNA的亲和力,从而抑制肿瘤细胞DNA的损伤修复能力,发挥抑制结肠癌细胞EMT和迁移侵袭的作用,为临床抗结肠癌转移治疗提供新的思路和作用靶点.
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