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目的
检测RECK基因、基质金属蛋白酶MMP-2及MMP-9在神经母细胞瘤组织中的表达,进一步探讨神经母细胞瘤发生、发展、侵袭和转移机制。
方法(1)体内水平检测RECK、MMP-2、MMP-9基因在瘤组织中的表达:采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法对35例神经母细胞瘤患儿瘤体蜡块组织(转移组及无转移组)中的基因表达情况进行检测;(2)体外水平检测RECK、MMP-2、MMP-9基因在瘤组织中的表达:建立荷瘤裸鼠模型,获取新鲜肿瘤组织标本,采用SuperArray系列Oligo Tumor Metastasis Microarray基因芯片对标本进行芯片杂交,检测发光信号,通过图像及数据分析检测基因表达差异。
结果(1)体内水平:人神经母细胞瘤组织RECK基因在转移组中的阳性表达率为6.7%,明显低于在无转移组中的表达,两组间差异有统计学意义(P=0.018)。MMP-2及MMP-9基因在转移组中的表达分别为86.7%及73.3%,明显高于在无转移组中的表达,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。(2)体外水平:在荷瘤裸鼠神经母细胞瘤的肿瘤组织中,与原位瘤组织相比,转移瘤上调>2倍的基因为MMP-2、MMP-9,下调>2倍的基因为RECK。
结论RECK、MMP-2、MMP-9基因有可能作为判断神经母细胞瘤的侵袭性和预后情况的参考指标,可能会作为其预测指标和干预靶点,对其诊断及治疗提供重要的指导作用。