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目的
探讨不同浓度改性甲壳素对体外培养人成纤维细胞的影响。
方法使用含0、10、100、500、1 000、2 000、5 000 mg/L改性甲壳素的培养基体外培养人成纤维细胞株HFF，培养0、1、2、4、8、14 d后进行相应检测。采用MTT法评价改性甲壳素的细胞毒性，酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞培养上清Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量，反转录（RT）-PCR、免疫印迹法检测Ⅰ型胶原、增殖细胞核抗原（PCNA) mRNA和蛋白的表达。
结果培养0、1、2、4、8、14 d MTT法检测显示，与对照组（0 mg/L改性甲壳素）比较，浓度为10、100 mg/L的改性甲壳素对HFF细胞无明显细胞增殖抑制作用；而浓度为500、1 000、2 000、5 000 mg/L的改性甲壳素对HFF细胞增殖具有明显抑制作用，且具有时间和浓度依赖性（均P<0.05）。ELISA检测显示，500、1 000、2 000、5 000 mg/L的改性甲壳素处理HFF细胞2 d，各组细胞分泌Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量均显著减少，与对照组比较差异均有统计学意义（均P<0.05）。RT-PCR和免疫印迹检测显示，500 mg/L改性甲壳素处理HFF细胞0~14 d，随着培养时间延长Ⅰ型胶原、PCNA mRNA和蛋白表达均逐渐降低（均P<0.05）。
结论改性甲壳素可明显抑制成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原、PCNA表达，有望在疤痕的防治中发挥作用。