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通过摇瓶批式发酵方法和2 L发酵罐补料分批发酵方法研究了碳及氮源在提高重组酵母S.cerevisiae 20B-12（pNA3）表达分泌水平中的作用，得出采用分段发酵方法，在诱导期补充替代碳源（乳糖或甘油）并以营养丰富的天然氮源（酵母膏）诱导产物分泌可使重组酵母表达、分泌水平有较大提高。在补料分批培养中通过生长阶段加速补充碳源,产酶阶段补充替代碳源和分次补加酵母膏的方法使重组酵母表达、分泌水平进一步提高，从而为流加培养和工业化放大提供了依据。