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目的
研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)早期mRNA和蛋白水平的表达变化及其作用。
方法1.实验1：36只7日龄SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组，6只)和模型组(HIBD组，30只)，模型组根据HIBD后处死大鼠时间的不同又分为5个亚组(6 h、12 h、24 h、48 h、72 h，每组各6只)。实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blot分别检测HIF-1α mRNA和蛋白表达水平。2.实验2：将45只7日龄SD大鼠按随机数字表法分为3组：Sham组、HIBD组、2-甲氧基雌二醇组(2ME2组)，每组各15只。依据实验1选取HIF-1α mRNA及蛋白表达水平最高的时间点处死取脑，免疫荧光检测HIF-1α蛋白的分布与表达，HE染色观察脑组织病理形态学变化，干湿重法测定脑组织含水量，原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。
结果HIBD早期HIF-1α mRNA和蛋白表达水平均呈先升高后下降趋势，并于HIBD后24 h其mRNA表达水平(3.38±0.21)和蛋白表达水平(2.81±0.36)最高。Sham组HIF-1α蛋白主要在细胞质中表达，HIBD组其主要在细胞核中表达。Sham组、HIBD组和2ME2组3组间在HIF-1α染色阳性细胞数、脑组织含水量、细胞凋亡率的比较差异均有统计学意义(均P<0.05)，且2ME2组均显著低于HIBD组(均P<0.05)，脑组织病理形态学改变也较HIBD组轻。
结论HIBD后24 h HIF-1α mRNA和蛋白表达水平最高，抑制HIF-1α的表达，可减轻缺氧缺血所致的脑损伤，推测HIF-1α在新生大鼠HIBD早期可能起损伤作用。