β-分泌酶底物肽反转录病毒载体及其包装细胞株的构建

来源 :西安交通大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:joshcky
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目的 用pLXSN反转录病毒载体构建介导β-分泌酶底物肽(BACEsp)基因表达的pLXSN—BACEsp反转录病毒载体,并建立高效、稳定表达BACEsp的包装细胞株。方法 根据BACEsp基因序列设计引物,PCR合成的BACEsp片段和pLXSN载体用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切后连接,构建成表达BACEsp的pLXSN—BACEsp反转录病毒载体。用脂质体介导转染PT67包装细胞,经抗性筛选后,挑单克隆扩大培养,用NIH3T3细胞测定病毒滴度,筛选出高效产毒细胞株。结果 经酶切、连接后构建成的质粒称为
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