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摘 要：以木屑、棉籽壳、玉米芯等为主要原料组合10个配方进行泰山赤灵芝栽培配方筛选试验，以生物转化率为主要参考指标，结合子实体形态进行综合评价。结果表明：灵芝最佳代料栽培配方为配方①（木屑15%、棉籽壳60%、玉米芯15%、麸皮8%、石膏1%、石灰1%）和配方③（棉籽壳90%、麸皮8%、石膏1%、石灰1%），干芝生物转化率分别为6.60%和6.45%。
关键词：灵芝；培养料配方；生物转化率
中图分类号：S567.3+10.44 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2013）11-0060-03
灵芝（Ganoderma lucidum）是中国传统的药用真菌，具有扶正固本、提高机体免疫力等多种功能[1～4]。目前灵芝人工栽培主要分为段木和代料两种方式。代料栽培省时省力省地，可防止过度砍伐树木，有效保护生态环境，但代料栽培配方各异，导致产量差异较大。为此，笔者利用木屑、棉籽壳和玉米芯进行了灵芝代料栽培配方筛选试验，以生物转化率为主要考核指标，筛选最佳灵芝代料栽培配方，为灵芝代料栽培提供参考。
1 材料与方法
1.1 供试菌株
供试菌株‘泰山赤灵芝1 号（TL-1）’：由泰安市农业科学研究院选育。
1.2 培养基质配方
玉米芯粉碎至粒径0.5 cm以下；木屑为槐木木屑，过筛剔除坚硬杂物。玉米芯和木屑吸水性差，提前1 天预湿。栽培原料符合NY5099-2002食用菌栽培基质安全技术要求，不使用任何添加剂，不使用农药。培养料配方见表1。
母种培养基为PDA加富培养基，具体配方参照文献[5]。
原种培养基配方：棉籽壳39%、杂木屑30%、玉米芯20%、麸皮8%、石膏1%、石灰1%、白糖1%。
1.3 试验方法
装料、接种：栽培袋采用聚丙烯袋，规格为18 cm×39 cm×0.004 cm，装好料后常压蒸汽灭菌12 h，待料温降至25℃以下进行接种（接种菌龄和接种量一致）。
发菌培养：菌袋接种后放入培养室25℃避光培养，保持环境清洁和通风良好，发现杂菌感染的菌袋及时清理。
出芝管理：菇棚内墙式排袋两端割口出芝。具体栽培技术要点参照文献[6]。保证不同配方管理条件一致。出芝期不使用任何添加剂和农药，病虫害采取综合防治，以环境的预处理和卫生维护为主。
采收：当菌盖不再增大、边缘增厚，芝片木质化加重，上附少量孢子时即可采收。一般只收一潮，温度合适时可收第二潮。
试验设计：试验采用随机区组设计，重复3次，每处理30袋。
1.4 评价项目
发菌期间，观察菌丝长势，用划线法测定菌丝生长速度，调查菌袋污染率并及时清理。出芝期间观察和记录原基分化、菌柄伸长、成熟时间及出芝发病率，观测子实体形态特征，统计产量，计算生物转化率。
干芝生物转化率（%）=子实体干重（g）/培养料干重（g）×100
采用DPS处理系统V3.01版软件对数据进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 不同配方菌丝生长情况
‘泰山赤灵芝1 号（TL-1）’在配方⑤上菌丝生长速度最快，其次是配方②、⑧、⑥，最慢的是配方③（表2）。TL-1在10个不同配方上菌丝定植期和长势差异不明显。菌丝满袋时间与菌丝生长速度有关，菌丝生长速度快的菌丝满袋时间一般41～45 d。发菌阶段，配方③、⑦所有菌袋均未污染，配方①、④、⑥、⑨污染率相对较高，杂菌种类主要是绿霉菌。
表2 不同配方菌丝生长情况
注：表内同列不同大小写字母分别代表0.01和0.05水平差异显著；+++表示菌丝浓密。下表同。
2.2 不同配方子实体发育情况
‘泰山赤灵芝1 号’在不同配方上子实体发育情况差异明显（表3）。原基分化较快的是配方③、④、⑧，均为6 d，其次是配方①、②、⑦，为7～8 d，其他配方原基分化较慢，为10～11 d；芝柄伸
表3 不同配方子实体发育情况
2.3 不同配方子实体形态比较
‘泰山赤灵芝1 号 ’在不同配方上子实体形态存在差异（表4）。子实体菌盖以⑩、③、①配方较大；菌盖厚度以⑨、⑦、⑩配方较厚；菌柄长度以⑨、③、⑤配方较长；菌柄直径以⑥、⑧配方较细，其他配方子实体菌柄较粗。
表4 不同配方子实体形态比较
2.4 不同配方子实体生物转化率比较
不同配方子实体生物转化率差异显著（表5）。配方①、③处理较好，干芝生物转化率较高，分别为6.60%和6.45%，2个配方间差异不显著；其次是配方④，干芝生物转化率为5.85%。
注：干芝总产量为30袋的产量之和。
3 小结
试验表明，配方①、③产量较高，干芝生物转化率分别为6.60%和6.45%，2个配方间差异不显著；其次是配方④，干芝生物转化率为5.85%；配方⑥、⑧产量最低，干芝生物转化率仅为3.71%和3.59%。供试配方中棉籽壳添加量分别为60%和90%的2个配方产量最高，子实体品质较好；而木屑添加量高于45%或玉米芯添加量高于60%的配方产量较低，干芝生物转化率均低于5%，子实体品质较差，这可能由于培养料中营养成分和碳氮配比不合理所致。
发菌速度快慢与产量没有明显的相关性。棉籽壳添加量为90%的配方③发菌速度最慢，而添加不同含量玉米芯（15%～60%）的配方②、⑤、⑥、⑧发菌速度均较快，这可能是因为添加一定量的玉米芯能够增加培养料的透气性，使菌丝生长速度快。
综上所述，最佳灵芝代料栽培配方为配方①（木屑15%、棉籽壳60%、玉米芯15%、麸皮8%、石膏1%、石灰1%）和配方③（棉籽壳90%、麸皮8%、石膏1%、石灰1%）。生产中可根据实际情况进行选择，配方①为秸秆类培养料配方，具有潜在开发利用前景。
参 考 文 献：
[1]
Jiang J， Slivova V， Harvey K， et al. Ganoderma lucidum suppress growth of breast cancer cells through the inhibition of Akt/NF-kappa B signaling [J]. Nutr. Cancer， 2004， 49 （2）： 209-216.
[2] 江振友， 林 晨. 灵芝多糖对小鼠细胞免疫功能调节作用的实验研究[J]. 微生物学杂志， 2003， 23（2）： 51-54.
[3] Lin Z B. Cellular and molecular mechanisms of immuno-modulation by Ganoderma lucidum [J]. Journal of Pharmacological Science， 2005， 99（22）： 144-153.
[4] 张晓云， 杨春清. 灵芝的化学成分和药理作用[J]. 国外医药·植物药分册，2006， 21 （4）： 152-155.
[5] 兰玉菲， 王庆武， 安秀荣， 等. 野生硫磺菌分离株ITS序列分析[J]. 食用菌学报， 2012， 19（2）： 31-34.
[6] 兰玉菲， 安秀荣， 王庆武， 等. 灵芝新品种‘泰山赤灵芝1 号（TL-1）’[J]. 园艺学报， 2011， 38（12）： 2427-2428.
关键词：灵芝；培养料配方；生物转化率
中图分类号：S567.3+10.44 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2013）11-0060-03
灵芝（Ganoderma lucidum）是中国传统的药用真菌，具有扶正固本、提高机体免疫力等多种功能[1～4]。目前灵芝人工栽培主要分为段木和代料两种方式。代料栽培省时省力省地，可防止过度砍伐树木，有效保护生态环境，但代料栽培配方各异，导致产量差异较大。为此，笔者利用木屑、棉籽壳和玉米芯进行了灵芝代料栽培配方筛选试验，以生物转化率为主要考核指标，筛选最佳灵芝代料栽培配方，为灵芝代料栽培提供参考。
1 材料与方法
1.1 供试菌株
供试菌株‘泰山赤灵芝1 号（TL-1）’：由泰安市农业科学研究院选育。
1.2 培养基质配方
玉米芯粉碎至粒径0.5 cm以下；木屑为槐木木屑，过筛剔除坚硬杂物。玉米芯和木屑吸水性差，提前1 天预湿。栽培原料符合NY5099-2002食用菌栽培基质安全技术要求，不使用任何添加剂，不使用农药。培养料配方见表1。
母种培养基为PDA加富培养基，具体配方参照文献[5]。
原种培养基配方：棉籽壳39%、杂木屑30%、玉米芯20%、麸皮8%、石膏1%、石灰1%、白糖1%。
1.3 试验方法
装料、接种：栽培袋采用聚丙烯袋，规格为18 cm×39 cm×0.004 cm，装好料后常压蒸汽灭菌12 h，待料温降至25℃以下进行接种（接种菌龄和接种量一致）。
发菌培养：菌袋接种后放入培养室25℃避光培养，保持环境清洁和通风良好，发现杂菌感染的菌袋及时清理。
出芝管理：菇棚内墙式排袋两端割口出芝。具体栽培技术要点参照文献[6]。保证不同配方管理条件一致。出芝期不使用任何添加剂和农药，病虫害采取综合防治，以环境的预处理和卫生维护为主。
采收：当菌盖不再增大、边缘增厚，芝片木质化加重，上附少量孢子时即可采收。一般只收一潮，温度合适时可收第二潮。
试验设计：试验采用随机区组设计，重复3次，每处理30袋。
1.4 评价项目
发菌期间，观察菌丝长势，用划线法测定菌丝生长速度，调查菌袋污染率并及时清理。出芝期间观察和记录原基分化、菌柄伸长、成熟时间及出芝发病率，观测子实体形态特征，统计产量，计算生物转化率。
干芝生物转化率（%）=子实体干重（g）/培养料干重（g）×100
采用DPS处理系统V3.01版软件对数据进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 不同配方菌丝生长情况
‘泰山赤灵芝1 号（TL-1）’在配方⑤上菌丝生长速度最快，其次是配方②、⑧、⑥，最慢的是配方③（表2）。TL-1在10个不同配方上菌丝定植期和长势差异不明显。菌丝满袋时间与菌丝生长速度有关，菌丝生长速度快的菌丝满袋时间一般41～45 d。发菌阶段，配方③、⑦所有菌袋均未污染，配方①、④、⑥、⑨污染率相对较高，杂菌种类主要是绿霉菌。
表2 不同配方菌丝生长情况
注：表内同列不同大小写字母分别代表0.01和0.05水平差异显著；+++表示菌丝浓密。下表同。
2.2 不同配方子实体发育情况
‘泰山赤灵芝1 号’在不同配方上子实体发育情况差异明显（表3）。原基分化较快的是配方③、④、⑧，均为6 d，其次是配方①、②、⑦，为7～8 d，其他配方原基分化较慢，为10～11 d；芝柄伸
表3 不同配方子实体发育情况
2.3 不同配方子实体形态比较
‘泰山赤灵芝1 号 ’在不同配方上子实体形态存在差异（表4）。子实体菌盖以⑩、③、①配方较大；菌盖厚度以⑨、⑦、⑩配方较厚；菌柄长度以⑨、③、⑤配方较长；菌柄直径以⑥、⑧配方较细，其他配方子实体菌柄较粗。
表4 不同配方子实体形态比较
2.4 不同配方子实体生物转化率比较
不同配方子实体生物转化率差异显著（表5）。配方①、③处理较好，干芝生物转化率较高，分别为6.60%和6.45%，2个配方间差异不显著；其次是配方④，干芝生物转化率为5.85%。
注：干芝总产量为30袋的产量之和。
3 小结
试验表明，配方①、③产量较高，干芝生物转化率分别为6.60%和6.45%，2个配方间差异不显著；其次是配方④，干芝生物转化率为5.85%；配方⑥、⑧产量最低，干芝生物转化率仅为3.71%和3.59%。供试配方中棉籽壳添加量分别为60%和90%的2个配方产量最高，子实体品质较好；而木屑添加量高于45%或玉米芯添加量高于60%的配方产量较低，干芝生物转化率均低于5%，子实体品质较差，这可能由于培养料中营养成分和碳氮配比不合理所致。
发菌速度快慢与产量没有明显的相关性。棉籽壳添加量为90%的配方③发菌速度最慢，而添加不同含量玉米芯（15%～60%）的配方②、⑤、⑥、⑧发菌速度均较快，这可能是因为添加一定量的玉米芯能够增加培养料的透气性，使菌丝生长速度快。
综上所述，最佳灵芝代料栽培配方为配方①（木屑15%、棉籽壳60%、玉米芯15%、麸皮8%、石膏1%、石灰1%）和配方③（棉籽壳90%、麸皮8%、石膏1%、石灰1%）。生产中可根据实际情况进行选择，配方①为秸秆类培养料配方，具有潜在开发利用前景。
参 考 文 献：
[1]
Jiang J， Slivova V， Harvey K， et al. Ganoderma lucidum suppress growth of breast cancer cells through the inhibition of Akt/NF-kappa B signaling [J]. Nutr. Cancer， 2004， 49 （2）： 209-216.
[2] 江振友， 林 晨. 灵芝多糖对小鼠细胞免疫功能调节作用的实验研究[J]. 微生物学杂志， 2003， 23（2）： 51-54.
[3] Lin Z B. Cellular and molecular mechanisms of immuno-modulation by Ganoderma lucidum [J]. Journal of Pharmacological Science， 2005， 99（22）： 144-153.
[4] 张晓云， 杨春清. 灵芝的化学成分和药理作用[J]. 国外医药·植物药分册，2006， 21 （4）： 152-155.
[5] 兰玉菲， 王庆武， 安秀荣， 等. 野生硫磺菌分离株ITS序列分析[J]. 食用菌学报， 2012， 19（2）： 31-34.
[6] 兰玉菲， 安秀荣， 王庆武， 等. 灵芝新品种‘泰山赤灵芝1 号（TL-1）’[J]. 园艺学报， 2011， 38（12）： 2427-2428.