【摘 要】
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目的:以pUC19质粒为材料,通过常规的分子克隆实验方法构建基于限制性内切酶XcmⅠ的、可自行扩增的T载体母本质粒pUC19M,并对其进行承载能力的检测。方法:通过设计1对互补配对
【机 构】
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牡丹江师范学院生命科学与技术学院;
【基金项目】
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牡丹江师范学院青年学术骨干项目(“融合基因P2R2对烟草遗传转化的研究”,No.G201210);牡丹江师范学院国家级重点创新预研项目(“无飞絮转基因杨树品系的建立”,No.GY201203)资助
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目的:以pUC19质粒为材料,通过常规的分子克隆实验方法构建基于限制性内切酶XcmⅠ的、可自行扩增的T载体母本质粒pUC19M,并对其进行承载能力的检测。方法:通过设计1对互补配对的寡核苷酸,经过变性及退火后插入质粒pUC19的多克隆位点而引入2个XcmⅠ酶切位点,用XcmⅠ酶切后即获得含有3’突出T碱基的T载体。结果:经实验验证,pUC19M-T载体构建成功;其承载能力在1kb左右。结论:构建的T载体可以满足实验室基因克隆的需要。
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