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目的
建立能稳定表达全长人促甲状腺激素受体的细胞株并对其进行功能鉴定。
方法利用PCR方法钓取全长人促甲状腺激素受体(hTSHR)基因，纯化后交换进入线性化GV208载体，构建出重组载体，载体转化后在辅助包装原件载体质粒的帮助下包装成慢病毒颗粒，感染中国仓鼠卵巢细胞(CHO)，单克隆培养后筛选出稳定表达hTSHR的细胞，用qPCR检测其mRNA表达情况。用牛TSH(bTSH)或Graves病患者血清刺激细胞，检测上清cAMP浓度变化来鉴定构建的细胞株功能。
结果基因检测证明阳性转化子目的基因序列正确。与对照组或空白组细胞相比，构建的实验组细胞株表达的hTSHR mRNA升高，在受到bTSH刺激时，随着bTSH浓度增加，cAMP明显增高，初发Graves病患者血清刺激细胞时，与对照组血清相比cAMP明显增高。
结论构建的CHO细胞株能稳定表达全长人促甲状腺激素受体，并且该细胞株功能良好，可用于后续研究。