论文部分内容阅读
目的 观察转化生长因子β3(TGF-β3)自反馈调节信号通路中正向调节因子的作用.方法 用外源性TGF-β3诱导大鼠肝星状细胞系(HSC-T6),在不同时间点用荧光素酶报告基因分析法检测TGF-β3的启动子活性,Western印迹法检测cAMP反应元件(CRE)结合蛋白1(CREB-1)和磷酸化CREB-1的表达,实时荧光定量PCR法检测CREB-1 mRNA的表达情况.结果 外源性TGF-β3处理HSC-T6后,TGF-β3启动子活性表现出时间依赖性增高,并于诱导后24 h达峰值[10.68±0.57,2.2倍于对照组(4.83±0.56)].TGF-β3启动子的基础活性下降了85%(0.73±0.03,P<0.05).外源性TGF-β3可在短时间内上调磷酸化CREB-1的表达,与对照组(比值为1)相比,15 min即可见明显增加(1.5倍于对照组),1 h时其表达量达到最大值(2.0倍于对照组),12 h略见下降(1.9倍于对照组,均P<0.05).外源性TGF-β3对HSC-T6中CREB-1 mRNA和CREB-1蛋白的表达均无影响(均P>0.05).结论 外源性TGF-β3可促进TGF-β3启动子活性增强,且CRE位点在外源性TGF-β3介导的TGF-β3启动子活性中发挥重要作用;外源性TGF-β3可活化CREB-1,但不能促进CREB-1蛋白及mRNA的表达。