背景:现有镇痛药物均有不同类型及程度的不良作用,一定程度上制约了疼痛的治疗。中药镇痛作用的多靶点、多层次机制,对于疼痛治疗有一定优势。目的:观察附子汤与芍药甘草汤合用,对疼痛动物模型的镇痛作用及其可能的作用途径。设计:随机对照观察。单位:山西医科大学汾阳学院中心实验室。材料:实验于2004-10/2004-12在山西医科大学汾阳学院中心实验室完成。选择SD大鼠50只;昆明种小鼠60只。经过痛域预筛,选择痛域相近的动物用于实验。方法:①附子汤合芍药甘草汤制备:附子先煎1h,芍药、白芍(酒炒)、甘草(蜜灸)750mL/L乙醇提取,0.5h/次,共3次回收乙醇。合并各提取液浓缩至含生药4g/mL。②附子汤合芍药甘草汤对甲醛溶液致痛模型大鼠的镇痛作用:SD大鼠50只分为5组,即模型组、阿司匹林组、附子汤合芍药甘草汤40g/kg,20g/kg,10g/kg组,每组10只。模型组和阿司匹林组分别给予25mL/L甲醛溶液10mL/kg和阿司匹林0.2g/kg,各组均灌胃给药。各组给药前在大鼠左后肢足趾部皮下注射25mL/L甲醛溶液50μL,分别记录注射甲醛溶液1～5min(Ⅰ相)和15～40min(Ⅱ相)内疼痛反应的累积时间进行评分。疼痛累积分值=(抬起注射脚时间×1+咬和抖动注射脚时间×2)/300。实验动物饲养1周后,灌胃给药连续3d,第3天给药1h后左后肢足趾部皮下注射25mL/L甲醛溶液50mL,按上述方法计算疼痛累积分值。计算镇痛评分值,即给药后累积分值/给药前累积分值×100%。③冰醋酸致痛小鼠血清、脊髓中一氧化氮、前列腺素和超氧化物歧化酶的测定:昆明种小鼠60只分为6组,设空白对照组、模型组、阿司匹林组、附子汤合芍药甘草汤40g/kg,20g/kg,10g/kg组,每组10只。空白对照组和模型组分别腹腔注射生理盐水10mL/kg和6g/L冰醋酸溶液10mL/kg,阿司匹林组、附子汤合芍药甘草汤40g/kg,20g/kg,10g/kg组于给药第3天给药1h后,腹腔注射6g/L冰醋酸溶液10mL/kg。注射冰醋酸10min后,小鼠眼后静脉丛采血,分离血清,测定一氧化氮浓度(催化光度法)、前列腺素含量(紫外分光光度法)、超氧化物歧化酶活性。主要观察指标:①各组大鼠的镇痛评分值。②各组小鼠血清、脊髓中一氧化氮、前列腺素含量和超氧化物歧化酶活性。结果:SD大鼠50只及昆明种小鼠60只,全部进入结果分析,无脱失。①各组大鼠的镇痛评分值比较:附子汤合芍药甘草汤40g/kg组大鼠的Ⅰ相镇痛评分值显著低于模型组犤82.1±9.8,95.3±8.7(t=3.17,P<0.05)犦。附子汤合芍药甘草汤40g/kg,20g/kg组大鼠的Ⅱ相镇痛评分值均显著低于模型组犤69.7±10.4,73.2±7.5,98.9±6.7(t=6.64,6.08,P<0.01)犦。②各组小鼠血清、脊髓中一氧化氮、前列腺素含量和超氧化物歧化酶活性比较:阿司匹林组、附子汤合芍药甘草汤40g/kg,20g/kg,10g/kg组与模型组相比,一氧化氮、前列腺素含量均显著减少,超氧化物歧化酶活性显著增高(t=3.21～19.30,P<0.05～0.01)。附子汤合芍药甘草汤40g/kg,20g/kg组与阿司匹林组相比,一氧化氮、前列腺素含量均显著减少,超氧化物歧化酶活性显著增高(t=2.82～7.43,P<0.05)。结论:附子汤与芍药甘草汤提取物合用,能抑制甲醛溶液引起的Ⅰ相及Ⅱ相疼痛,显著降低冰醋酸疼痛模型小鼠血清中和脊髓中的一氧化氮、前列腺素的含量,增加超氧化物歧化酶的活性。提示二方合用对中枢及外周神经末梢均有镇痛作用,其镇痛作用可能与一氧化氮、前列腺素、超氧化物歧化酶改变有关。