【摘 要】
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目的：为深入研究IFITM3抗禽流感病毒作用及其分子机制提供细胞模型,建立稳定表达人IFITM3蛋白的A549细胞株。方法：首先合成引物,分离人外周血单个核细胞,PCR扩增IFITM3基因,进
【机 构】
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延边大学农学院,吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（31472197）, 吉林省青年科研基金项目（20140520173JH）, 病原微生物生物安全国家重点实验室开放课题（SKLPBS1435）资助
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目的：为深入研究IFITM3抗禽流感病毒作用及其分子机制提供细胞模型,建立稳定表达人IFITM3蛋白的A549细胞株。方法：首先合成引物,分离人外周血单个核细胞,PCR扩增IFITM3基因,进行DNA测序分析。测序正确后,将其克隆至慢病毒表达载体p LV-Puro中构建真核表达质粒p LV-IFITM3,转染A549细胞,在确定IFITM3可表达后,利用嘌呤霉素加压筛选稳定表达IFITM3的细胞株,通过荧光定量PCR和Western blot方法对获得的稳定细胞株进行鉴定,同时分析IFITM3蛋白在稳定细
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