稳定表达siRNA-STAT3基因Hep-2细胞系的建立

来源 :中国耳鼻咽喉头颈外科 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ZPHZPH

【摘要】

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目的建立稳定表达siRNA-STAT3基因的Hep-2细胞系,为进一步探讨STAT3在喉癌中的作用机制提供基础。方法产生针对STAT3的小发卡状RNA寡核苷酸,连接到PGPU6/GFP/Neo载体,双酶切

【作者】

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孙红村王俊阁皮丽宏高昆

【机构】

：

煤炭总医院耳鼻咽喉科,河北省人民医院耳鼻咽喉科,河北省人民医院麻醉科

【出处】

：

中国耳鼻咽喉头颈外科

【发表日期】

：

2010年8期

【关键词】

：

喉肿瘤癌鳞状细胞转录激活因子3 转染细胞增殖 Laryngeal Neoplasms Carcinoma Squamous Cell Activa

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目的建立稳定表达siRNA-STAT3基因的Hep-2细胞系,为进一步探讨STAT3在喉癌中的作用机制提供基础。方法产生针对STAT3的小发卡状RNA寡核苷酸,连接到PGPU6/GFP/Neo载体,双酶切和质粒测序鉴定真核表达质粒PGPU6/GFP/Neo-siRNA-STAT3,G418筛选稳定转染细胞系,蛋白印迹法测定p-STAT3的表达。分别用MTT法绘制生长曲线和平板克隆形成实验测定单细胞增殖能力。结果构建了重组干扰质粒并筛选出了阳性克隆,蛋白印迹法鉴定STAT3被抑制后p-STAT3表达也明显下

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