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经济高速发展的今天，国民素质正在提高，但随地吐痰的现象仍屡见不鲜，这不仅有损我国的形象，也易导致疾病的传播。痰液尤其是病人的痰液中含有大量致病菌，易传播疾病。
我对痰液处理的问题产生了好奇，于是和同学一起着手研究常见消毒剂对痰液的杀菌效果，希望能找到处理痰液的好方法。
查阅资料时发现我校2014级同学曾做过关于痰液的研究性学习课题，他们的课题研究给我提供了参考。
一、研究目标
通过阅读学长们的研究材料，我发现他们的实验过程存在两个问题：一是将实验用的痰液稀释1000倍，即用痰液稀释液进行痰液的消毒实验是如何确定的，依据不清楚。二是实验用的痰液稀释液标本源自一个人，实验结果有极大的偶然性，实验结论是由个别例子得出的普遍结论。
由此，我明确了研究方向：1.通过预实验确定痰液稀释液的浓度，以便观察痰液中菌落的个数。2.在做好第一步的基础上，采集多个不同年龄段、不同性别的人的痰液标本进行消毒对比实验，判断碘伏对痰液的消毒效果。
二、确定痰液稀释浓度的预实验
1.实验用品
（1）营养琼脂培养基1瓶，一次性培养皿500个，一次性手套100双，实验用酒精1瓶，84消毒液1瓶，碘伏1瓶。
（2）用可密封塑料袋取痰液，并记录研究对象的姓名、性别、年龄。
（3）配制营养琼脂培养基。称取16g琼脂溶于500ml蒸馏水中，加热溶解后分装于4个可密封塑料瓶中，高压灭菌后备用。
（4）取4支试管用报纸包好，可密封塑料瓶装入50ml清水，3支平板涂布器用报纸包好，高压蒸汽滅菌后备用。一次性吸管、移液枪待紫外灭菌后备用。
2.操作步骤
（1）将灭菌后的培养基快速分装至13个培养皿中，并进行编号。
（2）对痰液进行浓度梯度稀释。
将4支试管编号为1、2、3、4，用一次性吸管吸取1ml痰液放入1号试管中，加入9ml无菌水混合均匀，制得稀释10倍的痰液。
用一次性吸管吸取1ml 1号试管中的液体注入2号试管中，再加入9ml无菌水，混合均匀，制得稀释100倍的痰液。
用一次性吸管吸取1ml 2号试管中的液体注入3号试管中，加入9ml无菌水混合均匀，制得稀释1000倍的痰液。
用一次性吸管吸取1ml 3号试管中的液体注入4号试管中，加入9ml无菌水混合均匀，制得稀释10 000倍的痰液。
（3）分别用移液枪吸取0.1ml 1号试管中的痰液稀释液注入1-1、1-2、1-3培养皿中，吸取0.1ml 2号试管中的痰液稀释液注入2-1、2-2、2-3培养皿中， 吸取0.1ml 3号试管中的痰液稀释液注入3-1、3-2、3-3培养皿中，吸取0.1ml 4号试管中的痰液稀释液注入4-1、4-2、4-3培养皿中，吸取0.1ml无菌水注入对照培养基中，并用平板涂布器涂布均匀。
将培养皿封好，放入37℃恒温培养箱中培养，24h后观察结果，取菌落个数在30至300的稀释浓度为最佳痰液稀释浓度。
3.实验结果
痰液被稀释10倍时，1-1、1-2、1-3平板中的菌落数均远远大于300。当痰液被稀释100倍时，2-1、2-2、2-3平板中的菌落数均远大于300。痰液被稀释1000倍时，3-1、3-2、3-3平板中的菌落数仍大于300。痰液被稀释10 000倍时，4-1、4-2、4-3平板中的菌落数位于30至300之间。
所以，痰液稀释到10 000倍时，更加便于观察菌落的个数。
三、灭菌实验
1.实验用品
（1）用可密封塑料袋取痰液（8种），对其进行如下标号：青年男、青年女、中年男、中年女、老年女、老年男、病男、病女，并记录研究对象的姓名、性别、年龄。
（2）准备试管12支，密封瓶16个，平板涂布器16个，3个可密封塑料瓶各装入60ml清水以及配置好的营养琼脂培养基，移液枪枪头若干，待高压灭菌后备用，一次性吸管、移液枪待紫外灭菌后备用。
2.操作步骤
（1）将灭菌后的培养基快速分装至49（4×12 1）个培养皿中。
（2）将试管编号为青年男1、青年男2、青年男3；青年女1、青年女2、青年女3；中年男1、中年男2、中年男3；中年女1、中年女2、中年女3。
将密封瓶编号为青男84、青男酒精、青男碘伏、青男水；青女84、青女酒精、青女碘伏、青女水；中男84、中男酒精、中男碘伏、中男水；中女84、中女酒精、中女碘伏、中女水，培养皿编号如表1。
（3）分别取1ml痰液稀释液于密封瓶中，分别加入不同的消毒液，在摇床上摇动10min。
（4）分别取消毒过后的痰液0.1ml涂布到培养基中。将培养皿封好，放入37℃恒温培养箱中培养，24h后观察结果。
实验结果表明，84消毒液和碘伏对痰液中的细菌均有显著的杀菌效果，碘伏效果最好，酒精效果最差。
四、实验结果
针对痰液的消毒，使用碘伏消毒效果优于使用84消毒液消毒。因此我建议，在医院的传染病室可用碘伏对病人排出的体液消毒。（指导老师：熊梅初）
我对痰液处理的问题产生了好奇，于是和同学一起着手研究常见消毒剂对痰液的杀菌效果，希望能找到处理痰液的好方法。
查阅资料时发现我校2014级同学曾做过关于痰液的研究性学习课题，他们的课题研究给我提供了参考。
一、研究目标
通过阅读学长们的研究材料，我发现他们的实验过程存在两个问题：一是将实验用的痰液稀释1000倍，即用痰液稀释液进行痰液的消毒实验是如何确定的，依据不清楚。二是实验用的痰液稀释液标本源自一个人，实验结果有极大的偶然性，实验结论是由个别例子得出的普遍结论。
由此，我明确了研究方向：1.通过预实验确定痰液稀释液的浓度，以便观察痰液中菌落的个数。2.在做好第一步的基础上，采集多个不同年龄段、不同性别的人的痰液标本进行消毒对比实验，判断碘伏对痰液的消毒效果。
二、确定痰液稀释浓度的预实验
1.实验用品
（1）营养琼脂培养基1瓶，一次性培养皿500个，一次性手套100双，实验用酒精1瓶，84消毒液1瓶，碘伏1瓶。
（2）用可密封塑料袋取痰液，并记录研究对象的姓名、性别、年龄。
（3）配制营养琼脂培养基。称取16g琼脂溶于500ml蒸馏水中，加热溶解后分装于4个可密封塑料瓶中，高压灭菌后备用。
（4）取4支试管用报纸包好，可密封塑料瓶装入50ml清水，3支平板涂布器用报纸包好，高压蒸汽滅菌后备用。一次性吸管、移液枪待紫外灭菌后备用。
2.操作步骤
（1）将灭菌后的培养基快速分装至13个培养皿中，并进行编号。
（2）对痰液进行浓度梯度稀释。
将4支试管编号为1、2、3、4，用一次性吸管吸取1ml痰液放入1号试管中，加入9ml无菌水混合均匀，制得稀释10倍的痰液。
用一次性吸管吸取1ml 1号试管中的液体注入2号试管中，再加入9ml无菌水，混合均匀，制得稀释100倍的痰液。
用一次性吸管吸取1ml 2号试管中的液体注入3号试管中，加入9ml无菌水混合均匀，制得稀释1000倍的痰液。
用一次性吸管吸取1ml 3号试管中的液体注入4号试管中，加入9ml无菌水混合均匀，制得稀释10 000倍的痰液。
（3）分别用移液枪吸取0.1ml 1号试管中的痰液稀释液注入1-1、1-2、1-3培养皿中，吸取0.1ml 2号试管中的痰液稀释液注入2-1、2-2、2-3培养皿中， 吸取0.1ml 3号试管中的痰液稀释液注入3-1、3-2、3-3培养皿中，吸取0.1ml 4号试管中的痰液稀释液注入4-1、4-2、4-3培养皿中，吸取0.1ml无菌水注入对照培养基中，并用平板涂布器涂布均匀。
将培养皿封好，放入37℃恒温培养箱中培养，24h后观察结果，取菌落个数在30至300的稀释浓度为最佳痰液稀释浓度。
3.实验结果
痰液被稀释10倍时，1-1、1-2、1-3平板中的菌落数均远远大于300。当痰液被稀释100倍时，2-1、2-2、2-3平板中的菌落数均远大于300。痰液被稀释1000倍时，3-1、3-2、3-3平板中的菌落数仍大于300。痰液被稀释10 000倍时，4-1、4-2、4-3平板中的菌落数位于30至300之间。
所以，痰液稀释到10 000倍时，更加便于观察菌落的个数。
三、灭菌实验
1.实验用品
（1）用可密封塑料袋取痰液（8种），对其进行如下标号：青年男、青年女、中年男、中年女、老年女、老年男、病男、病女，并记录研究对象的姓名、性别、年龄。
（2）准备试管12支，密封瓶16个，平板涂布器16个，3个可密封塑料瓶各装入60ml清水以及配置好的营养琼脂培养基，移液枪枪头若干，待高压灭菌后备用，一次性吸管、移液枪待紫外灭菌后备用。
2.操作步骤
（1）将灭菌后的培养基快速分装至49（4×12 1）个培养皿中。
（2）将试管编号为青年男1、青年男2、青年男3；青年女1、青年女2、青年女3；中年男1、中年男2、中年男3；中年女1、中年女2、中年女3。
将密封瓶编号为青男84、青男酒精、青男碘伏、青男水；青女84、青女酒精、青女碘伏、青女水；中男84、中男酒精、中男碘伏、中男水；中女84、中女酒精、中女碘伏、中女水，培养皿编号如表1。
（3）分别取1ml痰液稀释液于密封瓶中，分别加入不同的消毒液，在摇床上摇动10min。
（4）分别取消毒过后的痰液0.1ml涂布到培养基中。将培养皿封好，放入37℃恒温培养箱中培养，24h后观察结果。
实验结果表明，84消毒液和碘伏对痰液中的细菌均有显著的杀菌效果，碘伏效果最好，酒精效果最差。
四、实验结果
针对痰液的消毒，使用碘伏消毒效果优于使用84消毒液消毒。因此我建议，在医院的传染病室可用碘伏对病人排出的体液消毒。（指导老师：熊梅初）